怎么样将出生后6天雄性小鼠的体细胞和生殖细胞分离？

chenchunlei

      本人想将出生后6天的雄性小鼠睾丸消化成单细胞后，怎么样才能将体细胞和生殖细胞分离，并且想去鉴定一下分离得到的生殖细胞，如何去鉴定？
5 F( n4 _& @" ~# Q/ I. ^; j   谢谢

chenchunlei

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你好，我想问一下那个差速贴壁的培养液配方能否告之？
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490096812

百分之50我觉得很高了 啊

chenchunlei

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( _# e) ~) U: L" y7 E) [% M半小时贴壁后，用的vasa一抗做得组化，阳性率也就有百分之五十吧，是不是贴壁时间太短了啊

ying

又来一行家

490096812

分离的话我们一般用差异贴壁，用多聚赖氨酸处理的。染色鉴定的话一般我们用thy1，plzf。分化的用c-kit

chenchunlei

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什么叫差速贴壁啊？今天消化成单细胞之后培养了3个小时，结果大部分贴壁了。! J% \- a9 a+ a. A+ S
培养液成分：DMEM 、a-MEM、 丙酮酸钠、PS、FBS

POPOLD

差速贴壁

sj03572001

明胶有助于成纤维细胞贴壁，至于精原干细胞的鉴定，可以采用SSC的标志物通过免疫组化进行鉴定，标志物包括MVH, Cdh1 ，THY1， plzf， nanos2, Oct4, Stra8等

chenchunlei

回复 sj03572001 的帖子4 l* ?9 o: o0 C! L( |

+ H& ]: ^. E. K6 A7 b6 I用10cm培养皿直接培养不行吗，那样体细胞会贴壁，生殖细胞悬浮吗？为什么还要铺琼脂呢？还有怎么去鉴定是精原干细胞啊？
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