淋巴细胞的转染困扰 - 实验室综合讨论区干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 实验室综合讨论区 › 淋巴细胞的转染困扰



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

发新帖

查看: 32361\|回复: 4	go [请教] 淋巴细胞的转染困扰 [复制链接]

Rank: 2

积分: 108
威望: 108
包包: 473

楼主

发表于 2012-6-10 16:10 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

请问各位高手，淋巴细胞需要怎样才能转得进去啊？因为我想用淋巴细胞EL4做双荧光报告分析，所以感觉使用病毒有点不现实，包装luciferase和renilla就很大了，但电转的条件实验室又还没有建立，使用lipo2000按照说明书试了一次，转染效率很低，大概只有0.01%，这个问题该如何解决啊？先谢过了

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

收藏0 分享0 顶0 踩0

回复引用

举报返回顶部

Rank: 2

积分: 108
威望: 108
包包: 473

沙发

发表于 2012-6-11 14:00 |显示全部帖子

谢谢，这个方法估计也难。我试过使用lipo转染GFP 24和48小时的，不换液。细胞死的不多，可是照荧光还是只有几个点。哎，电转的条件难摸啊

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 3	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

Rank: 2

积分: 108
威望: 108
包包: 473

藤椅

发表于 2012-6-12 22:17 |显示全部帖子

回复细胞海洋的帖子, G% d7 a6 |9 i! m
- f B/ i9 D# c9 n( Q
哦，知道了，谢谢

回复引用

举报返回顶部

Rank: 2

积分: 108
威望: 108
包包: 473

板凳

发表于 2012-6-12 22:19 |显示全部帖子

干细胞之家微信公众号

回复 chips100 的帖子3 _1 k3 m* |: c
. O8 N! M* w7 ?
程序换了电转仪以及不同的细胞估计都得变，我们实验室做了hela细胞摸条件，结果比lipo转染效率还差，被老板P了一顿后就不了了之

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

Rank: 2

积分: 108
威望: 108
包包: 473

报纸

发表于 2012-6-13 09:59 |显示全部帖子

回复 chips100 的帖子3 k$ k; w5 t4 H; [" v) {( e5 R
5 ~' X) }) F D+ A5 @" ]" z
哥们，你的建议确实很好。这个我也问过了，然后一问代理商说要6000多我就直接秒杀了这个念头，提都懒得跟老板提了。哎，小硕没地位啊

回复引用

举报返回顶部

‹ 上一主题|下一主题 ›

发新帖

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-3 23:54

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.