gFAP 染色

dianying

gFAP 染色：有没有用 BSA 封闭染色染得漂亮的，大家用PBS还是TBS呀？
' b/ G- G# W: M9 T0 ?/ X谢谢！

Yedan

我做immunostaning全是用10%FBS封闭的……

dianying

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  n3 {0 h% l+ ~& i- K4 `7 ^
0 `) D3 N; h& H5 w) ^* [9 E谢谢你！5 M6 @1 x3 s3 G0 X0 M* C  [
于我封闭没问题，我只是想知道简单短时的gFAP染色大家常用tbs还是 pbs去洗。

Yedan

8 n5 p- g" m/ l" x
, t" }' v) j# t) W! t6 U回复 dianying 的帖子
/ W+ o; V7 ]) G/ e% t
( x) Z) b. e) a& y: H% A2 t洗的时候不就是用封闭液去洗么，二抗完了染核的时候用PBS就行了

dianying

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- j- J$ C5 x! s, c# N" G' t
3 Q2 F6 }6 \1 h1 l& j7 Z. F第一次听说用封闭液去洗 ，可能是我孤陋寡闻了。

dianying

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* c& y+ u8 |% Y9 O
9 R3 t) Z4 P2 o1 v/ y看来你的方法比较传统，染核现在大家普遍用Mounting Medium with DAPI， 除非你的核很难出来。

Yedan

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; D2 w; I) v/ l! V, Z% y" h/ Z: j4 e8 t
染色不用封闭液去洗，难道用什么？封闭为了防止非特异性产生，你用PBS或者别的什么把BSA/IGG洗掉了，那不是白封闭了？染核……PBS+核染料就够了，没那么复杂，mES/hES都这样

dianying

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5 a5 z8 q' ^5 u: |3 C( S
+ @2 I( A8 W, j3 @# T) s那你有没有染过gFAP？表达的如何？可以分享吗？

Yedan

你要什么细胞的mES/iPS EB分化的么 hES的我做的neuron的 没GFAP只有nestin

dianying

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4 ]8 Z: `& M/ o
, @2 _4 t. c# F8 i我想看看标神经元和胶质细胞加DAPI三标。