DMEM-LG跟DMEM/F12的差别？

camus

一直在养人的BMSC跟小鼠的BMSC，长势一直不好，培养液用的是GIBCO的血清跟DMEM-LG，加1%的双抗
- X1 J8 i- T6 z; p" b- g' Y* b* w请问，是不是用DMEM-F12会好一点？另外，见有人添加了谷氨酰胺，请问这个是不是必须添加的？细胞提取原代的方法应该没什么大的问题，但是就是细胞长得很慢，形态一直拉不长，请问是什么原因，请高手帮忙分下下 谢谢~！

myboluo

DMEM-LG，是低葡萄糖的DMEM吗？只要不是GIBCO的含GlutaMAX™的培养都要加谷氨酰胺，因为谷氨酰胺易降解，4度两周就需要重新添加了，所以一般买回来的液体培养基都需要补充。GlutaMAX™是长效型的谷氨酰胺，所以只要培养基不过期应该就不用加。
. w% e) U: b" @! R0 R4 PDMEM-F12是适于各类干细胞培养的基础培养基，按不同目的还需要你补加其它东西。但是我之前养原代大鼠BMSC也没额外添加什么，就加了谷氨酰胺和双抗，还用的是四季青的血清。培养基倒是用的DMEM/F12

camus

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$ p/ y% X. x6 _7 W4 b6 n  r. y# l( R$ a6 t! z
非常感谢，我现在买的是gibco公司的谷氨酰胺，100x的，问过一个学长，他说要稀释到1x以后再用，我想知道是直接加原液1ml到培养液当中还是怎么样？货号是25030081，麻烦老大们帮忙看一下，谢谢！

camus

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5 l5 `5 l, \! F1 ~/ u, w另外，dmem/f12不是用来培养神经性细胞的嘛？养间充质会不会容易导致分化？因为后面要做慢病毒，所以对细胞要求比较高

zmm

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# U/ n7 D* C* s7 f5 \0 n, q# K' S; P" L* u5 z
DMEM-LG是低糖DMEM，还是用F12会好一些。其实这个培养基最重要的就是血清了，你要用高质量的血清的话，效果会好很多。加入谷氨酰胺的话，细胞会增殖会快一些。

myboluo

100x的谷氨酰胺直接按100:1加到培养基，100ml加1ml0 P/ X* L, a+ V' ~9 Z; `* O
dmem/f12是dmem和f12按1:1混合的培养基，F12是在一般培养基基础上加了一些微量元素和无机离子，本来是用于底血清或无血清培养或驯化的（商业的工程化细胞培养，不能含有血清），而混合后的dmem/f12营养成分非常全面，就我知道国外国内很多实验室都常用作干细胞的基础培养基。小鼠的BMSC原代我也头疼，当时没养过细胞系的不清楚，后来换题不做小鼠了。不过之前做功课在丁香园看过的大大们都是用的DMEM/F12
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camus

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2 {  I& {8 l# ?4 C- M+ D* |3 i
  m. i* V7 `  [3 d7 Z, k* H这个信息太有用了,非常感谢!!但是有人讲说DMEM/F12容易导致细胞分化.请问是这样吗?

camus

回复 myboluo 的帖子! e4 F# X* F) |
2 J# C# l. T7 ]: v; A
请问DMEM-LG中的营养成分是不是没有DMEM/F12中的全面/

zmm

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# Y& d9 u* n% u6 s
) A6 j/ |7 D) c3 U. T5 a7 U你可以试试一些公司的成品的细胞培养基，比较省事，效果也还不错，也不用担心用哪个成分会更好。

camus

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8 z; K, i4 P2 `( c" X9 |8 ]& [1 Z' q. _% ?4 z9 }/ k
资金问题哦。。。。。