求助各位大神，我想做有关神经球的双标免疫荧光

changbo529

回复 dianying 的帖子; V0 g) e/ v/ I  q
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抱歉啊，我还是不太明白。我的细胞是来自大鼠的。如果我选的一抗分别是兔抗大鼠和小鼠抗大鼠，那么我选的二抗是不是必须为不同种属的动物分别抗兔和抗小鼠，如山羊抗兔和驴抗小鼠，另外在这种情况下，我应该选择哪一种种属来源的血清封闭呢？。还是可以选择同一个种属的动物分别抗兔和抗小鼠，如山羊抗兔和山羊抗小鼠，望指导，或者给我一个关于大鼠细胞的一二抗种属选择的Protocol.谢谢啊

dianying

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种属的选择还需要看你用的细胞是从哪里来的--人还是动物？什么动物？一般你买的抗体都会有说明。* ~  N4 s' H. j
抗体加入的时间没什么特别，双标用不同的种属同时加入就可以。加二抗以后的各步都要避光。

changbo529

回复 dianying 的帖子* g  n) J6 |- [3 p3 s3 o
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我们这实验室有共聚焦。只是现在是个菜鸟，想了解下双标的染色步骤及注意事项，比如两种抗体加入的时间，及种属的选择方面。谢谢

dianying

回复 changbo529 的帖子% K: _8 P( E1 h9 ~3 F" E

: B2 ~2 p( R! @6 [: Q染色不难，只是照相要用激光共聚焦照Z扫描才能把不同层面都照着。