克隆边缘分化是什么原因？

momocy

我这克隆中间挺好，边缘分化是什么原因？是feeder的密度问题吗？这样的话用酶消化就不容易掉下来了，应该怎么办？ 请各位介绍点经验。9 D4 E: Y2 S; o, P) x1 W( C. l

bubble_w

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给一张feeder密度的图片

chenchunlei

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你在换液的时候不要开风机，还有就是与你接种的细胞密度有关，密度大的话两边容易往里卷，就像你现在的情况
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igdb

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( f9 {" A9 z+ t" l/ L4 N8 R
不要开风机？？风机？？就是超净台里呼呼往外吹风的那个风机？？ 为啥涅？

shewawa

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! M# p( f* Z# v回复 momocy 的帖子
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$ E# s* s% X$ t8 @: Q2 n这个山中研究室的一次讲座中提到过，是因为Feeder的原因。用MEF时很容易出现边缘分化，相反的用SNLfeeder的时候会出现中心分化。（可能记反了，总之是两个Feeder有不同的分化情况）

chenchunlei

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我之前的FEEDER也出现过这种情况，最重要的是接种密度要适中，还有培养液要预暖一下，个人认为开风机会有震动。所以每次都把风机关了
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shewawa

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7 [( k  C* \2 b; v% m+ b3 [3 n' a% @% Q5 ?
呵呵，研究员确实不一般，做的很精心啊。你说的我从来都没注意过，下次我也小心点试试~~. H% b; d: W9 ~8 w/ _' g
谢谢提醒

sizhengliu

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; L' e! T  ?: Y8 j, m, N$ E" r您说的MEF密度2万/cm2可以吗？

momocy

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$ B6 y' v6 `( [6 m6 \feeder密度应该是多少呢？

573639471

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& {) J, Z9 d7 T7 o; _是鼠的还是人的？如果是人 的3万/cm2，鼠的可以稍稀