siRNA困扰

luoziwei

准备RNA沉默MSC，不知道构建载体后直接转染好还是导入腺病毒再转染比较好？期待解答！！

xiphias

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* A/ a2 J) Y; u! E/ o1 N9 V! a4 G" i# F9 U
做腺病毒很麻烦的。
$ ?+ K  w2 R/ h8 \如果效率够高，什么方法都可以。

luoziwei

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1 [/ P. x, t- A: d  {4 V; E& v4 Z8 \
请问，你们一般用什么做干扰的载体？

luoziwei

回复 xiphias 的帖子( G9 \# ~1 X" T

+ g' K) }) v( P或者用什么方法转染进入细胞的？

orchard

我也想做RNAi，目前打算用慢病毒载体做，感染效率比较高吧

xiphias

回复 luoziwei 的帖子5 H4 ^4 J' L, o" U. t; c

8 s: Y! `. P$ I* A- |病毒。

franklinhg

MSC 一般的质粒转染比较难，如果做稳转的话 在筛选过程中 容易发生复制性衰老，最后结果不好说。 一般现在是以病毒（稳转是慢病毒比较多）为运输载体达到目的。 MSC一般是原代细胞，病毒感染也不易， 要优化很多条件，polybrene的浓度， 病毒的滴度，MOI的优化等等。 多看看文献再开始吧。磨刀不误砍材工！