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您好我最近在做间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和成脂细胞 [复制链接]

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发表于 2012-7-1 17:56 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-7-1 22:50 编辑
  g' k* ]" W! G) U' O( }
3 \3 h, g& A, \! V: E" L您好!我最近在做间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和成脂细胞,可以用vonkossa染色每次染色处理后都为土黄色,不是黑色,但是用茜素红染色却染上钙结节为红色,请问这是什么原因,许多报道说染色是黑色,请为那位好心人士提供一些相关的英文文献可以吗,谢谢您们了!

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沙发
发表于 2012-7-5 19:21 |显示全部帖子
谢谢您!给我有很大帮助

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藤椅
发表于 2012-7-8 23:12 |显示全部帖子
请问为何没有培养到第14天,诱导的许多脂肪细胞都破裂了,使用低糖DMEM诱导液可以吗?每次用油红染色许多黑色浓染飘起,请问那些是杂质吗,是不是应该用乙醇洗后才可以看到脂滴,可是洗后即便看到脂滴也被冲洗掉了呀
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板凳
发表于 2012-7-11 14:19 |显示全部帖子
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' z  _: n% H1 X1 T
% ?% S; w8 H) J, O- b2 s我是参考国内外文献报道,根据多数人用此培养基,我才按照这种方法配制的,培养基主要是hyclone 的L-DMEM+10%FBS(hyclone)+1μM地米+50mM IBMX+10μg/ml Insulin,维持培养基用L-DMEM+10%FBS+10μg/ml Insulin.刚一开始我使用诱导培养基21天单一性诱导,每周换液2次,后来我用3+3,诱导-维持,4个循环,每次染色都能看到上浮被油红染色的脂肪滴,可是就是没法保持其在细胞内染色,很让我头痛,谢谢您能给予帮助
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报纸
发表于 2012-7-11 14:20 |显示全部帖子
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/ H/ w! g# S3 s' ~$ \( P, _
- R( `, ?7 ~1 q4 l$ @" L% c您好!我顺便想请问,您的成脂细胞添加物,除了上述的,还有什么

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地板
发表于 2012-7-11 17:34 |显示全部帖子
Won-kon Kim ,Hyeyun Jung,Do-Hyung Kim,et al.Regulation of adipogenic differentiation byLAR tyrosine phosphatase in human mesenchymal stem cells and 3T3-L1 preadipocytes.Cell science.2009

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发表于 2012-7-11 17:35 |显示全部帖子
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- B% Z& M, g9 l  g' _% X
Won-kon Kim ,Hyeyun Jung,Do-Hyung Kim,et al.Regulation of adipogenic differentiation byLAR tyrosine phosphatase in human mesenchymal stem cells and 3T3-L1 preadipocytes.Cell science.2009

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发表于 2012-7-11 17:36 |显示全部帖子
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& S5 V8 O" Y6 S
% N  ]8 H2 i7 q+ P6 B& v1 }! r对了还要加100μM吲哚美辛

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发表于 2012-7-11 17:37 |显示全部帖子
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! {0 Q/ K; |7 a4 E& h( k8 ]& N
- m' U4 g6 [% G" ]3 s. L  ]  f干细胞培养指南-裴雪涛出版的,也是这么写的

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发表于 2012-7-11 17:39 |显示全部帖子
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2 P0 J3 R! g/ y9 t; ?- \$ C& P, ?" G/ _7 Y
中文:2010年-低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干洗吧及其鉴定,也是这么说
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