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楼主: yaolinzhang
go

[请教] 分子克隆:现在问题估计出在了连接上,因为空载体单切自连做转化不成功   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-19 13:02 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 yaolinzhang 的帖子( f, w/ ?9 L" b! P7 Z: P
% m4 u% Q2 p3 V2 t9 y
太巧了,我在做一个克隆,情况跟你一模一样啊,载体单酶切自连接,双酶切连接目的片段都没有成功,但是空载体转化长得很好。一直找不到原因,我都想把目的片段P出来连T载体去测序了。无语啊。
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沙发
发表于 2012-7-19 21:57 |显示全部帖子
回复 weiyepan 的帖子" r* v5 m, T$ t* v
  A) W4 s+ |- }. \1 C: D8 ~4 A
一般载体切完都是跑胶回收的,而且用水溶的。. N6 V. R8 p3 m1 ?+ Y
PCR产物是用高保真酶做的,应该会有磷酸末端吧,具体有没有怎么鉴定啊?
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藤椅
发表于 2012-7-19 21:58 |显示全部帖子
回复 yaolinzhang 的帖子
3 `4 W! m* E* E# J
: t% ]9 V8 a4 `. V1 `你造血是做什么方面的呢?我做多能干向造血分化,以后多交流哈。
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