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干细胞老化表现:4 ~; G" ~6 F& ^/ E4 G, t3 E
①细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒,表示细胞开始出现老化;
" d' H$ x9 b; D2 H( `( v②细胞胞浆内出现空泡,则表明该细胞已老化或者已经开始分化(在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的);
9 \( {% \4 x# l7 u7 ?, E8 v' [③细胞立体感逐渐消失,细胞间的间隔不清,部分细胞扁平状,细胞的形状趋向多样;
0 y! D' u% Y1 E3 D T" A8 a* b- f④贴壁性减退,出现一些漂浮的细胞;( k6 s( E, O" B9 Q) r9 {
⑤部分分泌强的细胞分泌物增多,细胞表面会比较脏;
1 z2 S$ q. q+ ^# [: N! M⑥细胞增殖速度明显下降,分裂相的细胞明显减少.5 T; [( t$ S/ D: f7 B
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干细胞老化的原因和预防:/ r6 ]% c8 \; p
①接种密度的影响:部分干细胞具有一定的分泌性能,能够分泌一些对细胞有支持能力的因子类物质;所以必须维持一定的接种密度,否则会导致细胞增殖减慢,最后出现老化;. U- F3 Z9 }7 Y
②消化过度:消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞老化和分化;- D. V0 w7 K" ^9 K" W; f4 p* G
③合适的密度的时候就要传代:细胞如果过密,接触抑制作用会导致细胞的活力减弱并影响增殖导致老化;
; H" \* V, U T9 J8 J) G④使用合适的血清和培养基:不同的干细胞对培养基特别是血清的要求不同,所以使用不同的培养用的血清进行筛选,寻找最适合该干细胞培养的血清是预防细胞老化,维持细胞正常生长的重要保证.
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