神经干维持培养基maintainance medium配方

Dongqin11

如题，请教，一般神经干细胞（NSC）的维持培养基配方。" `# e# h- M0 }2 p+ Y- }
还有，神经干细胞的消化液可以用胰酶吗？有的说明书上说用Accutase,有什么不一样的吗？
7 n0 _, @8 c' z( v还还有，神经干细胞的冻存液跟一般细胞的一样吗？

Tim

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就是拿管直接吹打下来！

Dongqin11

回复 birdflubirdflu 的帖子# T4 Y+ m" Z2 \7 u* s" M0 `  S
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可是机械消化破坏力也不小吧，不好意思问一下，您怎么机械消化的啊？

birdflubirdflu

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一般都是用accutase,不过根据我的经历，accutase消化也很强，可能和批次有关吧，能机械消化还是机械消化吧。

小渝

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一般是neuralbasal加B27，但是这个相对DMEM/F12来说比较贵嘛，所以你懂得呀！嘿嘿嘿。。。

zhouzh8

回复 小渝 的帖子% L& o( y- x3 F( @: I# v2 O, ^

! }" G! p9 d# `- s谢谢解答。DMEM/F12和neuralbasal分别加了N2和B27之后1:1混合的，沿用实验室前辈的配方，我还不明白其中的道理...

小渝

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) ?$ j+ A: M; P9 w$ p可以呀，我又看到貌似看到这样的文献，也可以查看下以往的帖子，当中有介绍N2和B27的，但是貌似再加上EGF这个因子可能会好一点。DMEM/F12和Neuralbasal是不是有点重复了呀？还有如果你不想让它分化最好是用不含VitA的B27。如果有疑问建议多看点文献，另外可以看看以往的帖子，会很有帮助的哦！都是新手欢迎交流。

zhouzh8

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& t& D  y$ e6 ^! H用N2B27培养液可以吗？我现在手上有从mES诱导出来的待染色鉴定的NSC，用的是DMEM/F12+N2+Neuralbasal+B27+bFGF

BNJN

胰酶消化能力强，accutase是温和消化的，一般短时间内细胞团只会变得松散。消化完最好用培液洗两遍再吹打。

小渝

原代神经干细胞培养基配方：DMEM/F12+EGF+bFGF+B27，我自己的配方是这样，消化的话很多文献也说直接机械吹打，或者Accutase，也有用胰酶，就是这个时间和浓度的控制上需要好好研究下。冻存的话有商品化的专门的神经干细胞的冻存液。当然也有参考一般细胞的冻存配方，文献上都有介绍，建议多看看文献。本人也是新手一枚，这些也是看文献请教各位大神得知的，如有问题或不足还请各位老师多加指正。