求助：原核注射老是堵针，输卵管移植怎么做

longxiang

刚接触小鼠原核注射，发现注射针很容易堵住，大家有这种情况吗？怎么避免呢？
5 G0 C6 m( R- s还有在做小鼠胚胎移植的时候，输卵管总是凹陷在卵巢和子宫之间，伞部很难找，更难插入移液管，想问一下大家都是怎么做的呢？/ c; T* G$ x; z) D
无限感激啊………………

小刺猬2932056

我也是才开始做原核注射一段时间，堵针是很常见的，针堵了要换，移植时要把卵巢上的膜撕开一个小口的，暴露伞部

exin11

原核注射堵针主要是因为不熟练的缘故。% z/ U: Q2 L9 H% u! u
输卵管移植针，用普通的玻璃细管拉制就OK了，主要是在移植过程中用尖头镊子撕个小口，然后用钝头镊子轻拨输卵管，将中间的伞部暴露出来。针从口部轻轻一插就进去了，很好做的。

longxiang

回复 exin11 的帖子$ `6 L' _) m; M: W" c8 i1 {7 `

' m& f) o' G  i4 J* ?大神，能说说可以从哪些方面来避免堵针吗？
  N) u. V  h( }" [* ^% _6 g5 k还有，那个拉出来的卵巢是怎么放置的呢，总觉得伞部不能暴露出来，老是缩回去。
* |9 I; {7 J: T' h* x4 S谢谢！

longxiang

回复 exin11 的帖子/ {) ?: G2 H: {  F" A6 G! G
) N0 X# k  a: I% u4 H4 m, T. E5 q& Z
是不是有夹子夹着脂肪垫啊？那个夹子哪能买呢？

exin11

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- Q% T) E* S4 d' U. G1 J6 n+ A4 f7 k% s, C& _
不是哪方面，就是操作比不熟练而已，熟练了就不会堵针。% F( F6 c' ~$ N2 V
卵巢用一个脂肪夹夹住，很多地方有卖的，我们买的是鹤牌。3 J" C5 z4 P  K* Y
伞部一直在里面的，不能用镊子夹，直接用针插进去就好，旁边挡路的输卵管轻轻拨着就可以了

小刺猬2932056

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我们用的是止血夹，3cm 弯， 一般卖医疗器械的地方会有的

longxiang

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9 c! F5 u* u# u6 M买到了，用了以后果然好移植了，谢谢！4 u3 p' b; N8 R9 h

chijun

注射堵针可能是你的DNA不太干净，没有离心或过滤。
9 `  [' k2 M9 _% Q. v+ y输卵管移植么，就参照胚胎操作手册上，我个人经验看右侧比较好移植。* Y6 v% r7 S4 Z8 O) |. [7 h
缩回去，主要是你开口开的太高了，你再开低点，开得离尾部方向近一点就好了。
3 i4 b/ k  @$ J: @6 F$ `

funking

LZ是用手动注射器做的原核注射，还是用的电动注射器？
- ^, ~* C& c& P) v8 ^5 pChijun说的很对，建议你的样品在注射前高速离心10-15min