2i培养出现问题

zhangliqin

用2i培养mES时，刚开始细胞复苏起来可以贴壁，且长的还行，但是长到第三天之后，克隆开始大量飘起来，之后传代，细胞就不贴壁了，这是怎么回事呢？

huangcong1988

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0 b' N0 t) v& ?- O9 o# t( J6 V2i培养液跟楼主一样么？CHIR-99021 PD0325901

huangcong1988

哪2i？CHIR-99021 PD0325901吗？抑制分化的不是？

lindan666666

我们也用了2i培养液，小鼠ES细胞比平时养的惨多了，死得很多哦

lindan666666

我们用了2i的培养液也是效果不好，细胞死的很多哦

genedu

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按照我做大鼠ES和iPS的经验，飘起来的克隆真的是不错的克隆，然后把上清吸取，离心，再铺，都能长起来，时间比较长一点，还会飘，仅供参考哈

褚cell

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5 O5 x9 v0 l) I0 @' C# M  l1 k有时候支原体污染短期内不能表现出来，表现出来时候可能已经难以找污染源了，支原体污染有试剂盒，检测成本基本可以从新做细胞了

zhangliqin

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是整个克隆飘起来，上次看到细胞这样子就没有拍了，等过几天拍了在传

genedu

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你的细胞飘起来的时候的时候是单个细胞呢？还是克隆状？如果有图的话，发个过来大家瞧瞧

zhangliqin

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, V$ ?. f: {& h7 B6 S4 B但是在血清培养条件下不会出现这样的问题，所以不应该是细胞污染吧？实验室刚开始养细胞，没有检测污染的试剂盒，请问你们都是用什么KIT检测呢？