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询问:BABL/c小鼠 尾静脉注射 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-16 12:06 |显示全部帖子
本帖最后由 细胞海洋 于 2014-9-17 09:11 编辑
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关键步骤是:
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9 s* [( s" A# ~2 k( |, ~1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。* j* M) ?5 S; p
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小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
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% @( `7 D; S9 q4 m5 E或者用这个方法:1 小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠;2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;3、先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;4、进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快掌握的,不难,绝对不难!我练习10余只小鼠就比较熟练了
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8 {; C0 g) l8 I0 z" x9 p" E1 k: F" e2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。$ ?5 E+ Y2 v" V. n
3.用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法:握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处 按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(关键),如果血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。
. L; ~2 H" f: L* g原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。
# _6 S# L/ }: W3 ~$ u* I4.注射:注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。
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: ^, c! I$ m- O$ q2。注射:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,容易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分,越急越打不进去。后来静下心来,边注射边找感觉,很快就熟练了。8 L3 |5 O0 h, Y' Y$ t5 M
祝你找到感觉
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5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内;
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3 f; d0 q: p. J" V6.注射.
" l" h2 W2 G1 j1 s  V做到以上步骤,保证注射成功!4 i! N1 y# B$ {9 U
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注:(1)如果做细胞移植时,应该尽量把细胞打散,不然很容易引起栓塞!/ i( `, E4 D8 U7 b2 Q+ _
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(2)练习:建议你先用蓝墨水练手,因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉
5 W0 Y; `$ d: I( B+ b  O其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针,但是我觉得1/2处准确度较好,个人经验针头可以插深入些,防止意外摆动戳破静脉而注入皮下,很多时候你觉得进了血管打的却是皮下,就是因为这个原因。/ B' g5 _' W) Q+ f
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或者用:经常尾经脉注射胎盘兰,比较容易,静脉在侧面比较粗的那个,可以做个容器,我们是用一个50ml的离心管前面弄个开口,后面的螺盖弄个洞,把老鼠装进去,比较容易,把都对准管小鼠自动进去,把尾巴从盖子的洞穿出来,操作极为方便。刮毛,用热水烫一下,血管涨起来就可以,具体的感觉还要自己实践一下掌握,不过还容易,有3-4只就可以掌握。
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(3)规律:动物越小越好操作,小鼠比大鼠容易,幼年大鼠比成年大鼠容易;对于小鼠最好还是尾静脉注射,这样损伤最小;成年大鼠实在不行可以选股静脉注射,相对要容易一些;最重要的一点,必须多练,进针时的那种感觉必须自己好好体会,熟能生巧,这是常识。
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