干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 72366|回复: 1
go

[请教] RNA电泳,求解 [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
535 
威望
535  
包包
902  

金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2012-9-16 11:32 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
质粒模板要酶切线性化之后用蛋白酶K消化,酚抽,乙醇沉淀。转录时一定要加RNAse抑制剂RNAsin。全程要无RNAse。, O1 }8 N  S: i' A. R0 U
我觉得你这是转录时有污染。是不是没有加RNAsin啊?一般不会是跑胶的时候坏的。
  S3 T9 o0 Y' k% g: T3 l6 {- T我做的按你这一样的条件跑胶会是一条或两条带(两条带可能是非变性的情况下有二级结构),都是好的。* |' y4 L' d* V$ c, Y
已有 2 人评分威望 包包 收起 理由
runsong + 2 + 5 谢谢
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 12  包包 + 25   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
535 
威望
535  
包包
902  

金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-9-18 08:47 |显示全部帖子
回复 ying 的帖子
" y: C4 t, e- k2 I7 C. @2 J3 A
3 r) A' P3 J$ V+ M我个人觉得像。MMkit里面有阳性对照质粒的,你可以按照上面的trouble shooting做一下嘛。带上pos.ctr
+ q- |$ n" o, y- ~) Z) e- q; R我质粒线性化之后是要做PK消化和酚抽乙醇沉淀的。RNAsin只能干掉少量的RNAse,要是RNAse残留太多还是不行的。一般实验室RNAse主要来源就是小抽,你的枪最好洗一下。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-11-10 19:32

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.