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质粒模板要酶切线性化之后用蛋白酶K消化,酚抽,乙醇沉淀。转录时一定要加RNAse抑制剂RNAsin。全程要无RNAse。, O1 }8 N S: i' A. R0 U
我觉得你这是转录时有污染。是不是没有加RNAsin啊?一般不会是跑胶的时候坏的。
S3 T9 o0 Y' k% g: T3 l6 {- T我做的按你这一样的条件跑胶会是一条或两条带(两条带可能是非变性的情况下有二级结构),都是好的。* |' y4 L' d* V$ c, Y
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