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楼主: lmh_yixue
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[请教] 如何鉴别养的细胞是不是干细胞?   [复制链接]

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发表于 2012-9-20 14:53 |只看该作者
先看你是哪种干细胞,如果是原代的骨髓间充质干细胞,从形态上看,骨髓间充质干细胞一般成长梭形,或者不规则形且呈旋涡状排列,同时做流式的话,CD分子的表达现在一般遵循“CD34,CD45双阴性,CD44,CD90双阳性的原则,再进一步的做诱导鉴定的话,如果你的细胞能够诱导成成骨,成脂肪等,说明你的细胞就是干细胞了。可以看点相关的文献!
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发表于 2012-9-20 10:04 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子3 U2 U; v' w" d9 j* {

" s! |& ^' f/ \  N" o8 M) d6 t: y你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落(这不能称原绐细胞,注意)中,或许可以诱导它向原来的细胞分化,是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。- z, j" n: I( e

+ a' j3 K) o7 d" ?% @% H这个是什么意思呢?“收集来源的细胞集落”9 l/ y: v6 \, t$ j. l; A7 Z9 [
谢谢
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发表于 2012-9-20 10:03 |只看该作者
回复 sdwzg119 的帖子
8 L: T" l2 _1 B% U4 I' [6 w: k' r$ i
) D3 L  O  |8 A+ o3 ]三系诱导分化,这个能具体些吗?或者提供些参考文献,谢谢

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发表于 2012-9-19 20:18 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 ind6562 的帖子$ ?; |, z2 F5 v( T5 R
$ m: e& |5 j0 O8 |% L' d
预判挺难,前天把一个胚胎干细胞IM(内细胞团)也放入里面(间质细胞上),IM贴壁,两天后IM 找不到了,之前贴壁的地方转化成间质细胞。我怀疑是间质细胞分泌了某种因子诱导干细胞分化。
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发表于 2012-9-19 13:56 |只看该作者
回复 lmh_yixue 的帖子
9 g5 R) v$ {/ D- e3 [. ?+ d# @2 k, p0 o- s' O- |
ELISA应该可以,检测前你要先针对性地预判会有哪些因子,因为要买抗体。
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发表于 2012-9-19 13:31 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子; H0 k& x; h2 W8 n( |; p6 W

" K, \7 c: T% P我也觉得原来的细胞分泌了一些诱导因子,很想检测出来,可以用什么方法呢?在换液的时候我已经把旧的培养液收集起来了。
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发表于 2012-9-19 13:29 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子8 \8 x/ M! z$ |0 q6 O

$ H+ m  e" {6 |+ J- z真的受益匪浅!谢谢你细致的讲解!

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地板
发表于 2012-9-18 13:18 |只看该作者
回复 lmh_yixue 的帖子# m+ e4 Q/ C3 s5 t  I

+ E0 C+ @& ?+ w, ~如果能证明这两种是完全不一样的细胞,那就是。3 E$ f# `, j* Z2 d
诱导分化的方法很多,要看你希望你的细胞向哪个方向分化,比如加BMP(骨形态蛋白)就可促使一些干细胞向软骨或成骨分化。你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落(这不能称原绐细胞,注意)中,或许可以诱导它向原来的细胞分化,是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。
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报纸
发表于 2012-9-18 13:04 |只看该作者
干细胞也分好多类别的,一般肯定先简单相应的表型,然后诱导以后再鉴定是否分化成了相应的目的细胞。5 Y5 v$ ^. f4 A3 F% A  ~
0 z8 @2 C6 ~5 d9 [4 r* J
以间充质干细胞为例:鉴定了表型以后,在做三系诱导分化,就能证明细胞是间充质干细胞了。
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板凳
发表于 2012-9-18 09:58 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子- x) x2 R9 D/ T/ ?" r, Y
9 ?; i8 Y  |/ G6 @
我把养得的类似干细胞的集落放到获得干细胞的原始细胞(间质细胞)中,细胞分化成原始细胞(间质细胞)。这是诱导分化了吗?
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