如何鉴别养的细胞是不是干细胞？

ruofan1982

回复 sdwzg119 的帖子6 P# w$ A, D2 }& s- s( J' N- C1 j; @
3 z+ w5 \4 F( U# K8 Y+ R
三系诱导分化，这个能具体些吗？或者提供些参考文献，谢谢

ruofan1982

回复 ind6562 的帖子: H, Y: c! @/ V9 a; x

8 D# y- M) u7 m- V" k' P0 p你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落（这不能称原绐细胞，注意）中，或许可以诱导它向原来的细胞分化，是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。' y% D7 _8 q" K& w% Y  z% Y

. A  q" E+ r# D7 `. L这个是什么意思呢？“收集来源的细胞集落”
8 o( G4 ]4 L+ g3 D2 b' `1 V7 P谢谢

jensn

先看你是哪种干细胞，如果是原代的骨髓间充质干细胞，从形态上看，骨髓间充质干细胞一般成长梭形，或者不规则形且呈旋涡状排列，同时做流式的话，CD分子的表达现在一般遵循“CD34,CD45双阴性，CD44，CD90双阳性的原则，再进一步的做诱导鉴定的话，如果你的细胞能够诱导成成骨，成脂肪等，说明你的细胞就是干细胞了。可以看点相关的文献！

lmh_yixue

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1 m; c* w4 G+ u9 T+ k, P& S
" B( H* Y; c  [! O% O; N- D谢谢你！我看的文献太少了。是上皮组织的间质细胞。

huangxf1998

干细胞的特性即是你鉴定需要做的。
6 w* d) w7 W$ d/ x1.多潜能分化。当然要做诱导实验了。也就是把你养的干细胞通过各种诱导剂去诱导你的细胞形成各种组织细胞，常用的有骨细胞（激素就行）、脂肪细胞、神经细胞等等。
/ q! ^6 ]  s/ P8 Q% n/ ^1 }2 Y2.表面标记物。CD什么什么的，上面的弟兄都说了，你自己找吧。流式细胞还可以进行分离。
. v3 Y. P2 S7 k8 i! _; I. X5 B: b& `6 k3.克隆性。这个简单，把你的细胞稀释得几乎快没有了（多少倍我忘了，你自己找吧），然后放到培养皿里养，过几天形成克隆。' @( C$ p: k$ ^0 Y  A2 Z" {" [% |
9 }% @6 Y: [! j6 X" ]
有这三个实验就完全可以证明你的细胞是干细胞。我建议大家伙儿应该多看看书。中文的现在已经写得很清楚了，但最好是看英文的文献。这些文献大多发表在2000年前后，因为当时发表文章时，证明干细胞存在就是牛文。所以，对干细胞的描述非常多，而且详细。
/ X4 @. v' ]! G& v7 p) M说句实在话，现在发文章时不需要你提供这么多的数据。你问问你老板吧，他应该懂的。

lmh_yixue

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9 v9 x2 M' e/ F( @4 e
' }1 }6 |, s- S" c, C* ]$ V) R4 k我们准备对干细胞进行诱导分化了，除了加骨形态蛋白还有哪些？一般用哪个公司的好？

ind6562

回复 lmh_yixue 的帖子2 c' q- `# M7 W

6 A8 }* G9 D" w) c+ o+ K维甲酸，促进神经分化~~

sun_happone

另外，干细胞因为有很强的增殖潜能，因此它有比一般细胞高得多的核质比，用显微镜可以留意观察下。

Donnies

首先要看你的来源啊，用流式细胞仪的方法检测其表面特异性标志，进行筛选，肿瘤细胞的话，一般养不了多少代，养个10代之后，形态都发生了很大变化了

lousia04306

如果是MSC的话，按国际标准即可!  c% Y) S- c- Z' J. y
1.贴壁培养
0 B0 A' o/ l: h5 M2.特定的表面抗原（Ag）标志物
% c- R1 ^8 E9 ~# _+ u5 l3.多向诱导分化潜能等
8 V8 ~* q( X9 W# u1 ]. A5 k; T 首先，当保持在标准培养条件， MSC必须是采用组织培养瓶贴壁培养。此外，这些细胞流式细胞仪检测，必须表达CD105，CD73和CD90， 缺乏表达CD45， CD34 ， CD14的或细胞CD11b， CD79a或CD19和HLA-II类。 第三，细胞必须能够分化成骨细胞，脂肪细胞和软骨细胞在体外分化条件下标准。
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