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[请教] 关于外源质粒是否稳定遗传的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-9 15:30 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
把外缘质粒转入大肠杆菌是否可以稳定遗传(我觉得应该可以)?而把外缘真核表达载体瞬时转染进入动物细胞为何不能稳定遗传(它也有真核识别的复制子,可以复制吧,为什么不能稳定遗传给下面的)?
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沙发
发表于 2012-10-10 00:15 |只看该作者
外缘质粒导入的大肠杆菌是RM系统突变的特殊菌株,而真核细胞中不存在这种情况的,所以不行
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藤椅
发表于 2012-10-11 22:05 |只看该作者
把外缘质粒转入大肠杆菌是否可以稳定遗传这个比较复杂。! c3 P' K- ?7 k2 d1 Z
首先,大肠杆菌有基因组遗传和基因组外遗传,两者应该是互相独立的,两者的共同点是可以通过抗性基因保留遗传性质。基因组外遗传是否稳定就是由本身遗传物的元件决定的,拷贝数高,结构稳定,那遗传稳定的可能性就大;基因组遗传是否稳定就要看人品了,是需要反复筛选重组后的稳定株的,但是能重组进去的序列,重新重组出来的可能性也很大(实际上缺失一个基因要比插入一个基因容易得到稳定菌株)。- K* E2 k; ?! x8 h% W+ p3 O- F4 G
而真核细胞转入基因只有基因组遗传这一条路,瞬时表达虽然能得到所要的蛋白,但是基因的在基因组内的随机插入很多时候对细胞改变是很大的,甚至可能致命。所以要传n个世代筛选出看起来没对细胞没影响的插入获得稳定表达的细胞株。
+ `0 [" v2 d4 K: @我的理解就是这样,说的不对的话请指正补充。
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