逆转录病毒包装问题

huangcong1988

没有plat-e细胞系，也没有包装载体，只有表达载体，那么，只用表达载体转染PA317细胞能包毒成功吗？求购plat-e细胞，能提供购买商也很好。

huangcong1988

还有就是，我看cell biolabs有plat-e这个细胞卖，但貌似是个试剂盒，包装逆转录病的试剂盒，北京西美杰有代理，能买到吗？

第一心音

同问

ghfvcat

查了一下PA317细胞。; m5 S" M3 {- }# s( U
PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 * M! J- E* o! r7 e* v
8 B9 _: R8 r; W( U) y8 y. D
TK- NIH/3T3细胞是早期原来包装逆转录病毒的细胞系，那时候的包装通常是用的全载体，也就是病毒载体没有那么多缺陷，可以用来做稳定的产毒细胞株的，二代以后把各种元件都拆到包装载体上后，这个细胞系就不能直接用了。至于加了包装结构的PA317细胞能不能用，倒也不清楚，要看你的载体骨架是什么了。
: G& E( N: G& Y+ ~0 ?( Pplat-e是可以用的，只要你载体上有包装信号就行。
& y# d9 T. H; V( U( I& J9 s包装载体难买么？国内很多实验室都有吧，让你们老板去要下就行了，比plat细胞好弄多了