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用无血清培养基(stemspan SFEM)培养脐带血造血干细胞应该添加哪些细胞因子? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-18 09:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
大家好!我需要做脐带血分离的造血干细胞的研究,使用磁珠分离法分离得到CD34+的细胞。现在在摸索培养基条件,我准备用stemcell公司的无血清培养基加入一些细胞因子来进行培养,但是不知道加哪些细胞因子和具体加入的量是多少。目前实验室有Flt-3 L ,SCF,TPO这三种细胞因子,我想先加这三种因子。有没有大神做过相关的实验,这三种因子具体加入的量是多少啊?或者大家能不能给些具体的方法,我应该怎样摸索这三种细胞因子的加入量,实验方案应该怎么设计?
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沙发
发表于 2012-10-18 11:25 |只看该作者
还需要添加IL-3和IL-6.
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藤椅
发表于 2012-10-18 19:45 |只看该作者
回复 lixuejia 的帖子
6 O/ _' _  D' m2 N# m$ |2 w; ~8 j& x2 p) m* p, V8 `
必须还得添加IL-3和IL-6吗,我想要的细胞生长状况是只要保持干细胞的基线生长就可以了,不需要干细胞大量扩增。因为我之后要向干细胞中添加脂类,观察脂类对干细胞增值和分化的影响,所以我想要的细胞生长水平不需要特别好,否则外加的脂类对干细胞的影响作用可能就被掩盖了。
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板凳
发表于 2012-11-6 12:20 |只看该作者
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报纸
发表于 2012-11-14 16:20 |只看该作者
我们这使用的浓度都是100ng/ml,如果你要添加IL-3和IL-6的话就是10ng/ml和100ng/ml
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