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请教,为什么我用碱裂解法大提的质粒电泳只有两条带?     [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-25 08:06 |显示全部帖子
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回复 sanna1 的帖子# Z- h! a% X! _, y
8 @1 N, c; l! W' x
因为有超螺旋,线性、和缺刻3种质粒形式,他们的电泳速度不一样,线性跑得最慢好像,
" t5 Z4 q% J2 `( i& L! Q所以...0 w. D+ C6 J7 D. t6 p  T0 e& l6 A) X

. t" Z% `* L3 A. j% Z补充内容 (2012-10-25 08:09):+ I% c* K  g! E9 h" b7 @# X% _5 E5 `
如果是瞬转,建议环形质粒转染,因为环形质粒更容易进入细胞,这样可以提高转染后阳性率.
3 ^/ n. r7 |1 B# p: O  ]有人说的:如果是挑稳转,建议线性化以后转,因为稳转不要求转染效率,线性化的质粒更容易整合到细胞的基因组中,这样可以提高克隆
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沙发
发表于 2012-10-25 08:53 |显示全部帖子
回复 yuhaoze 的帖子
$ E$ v% L# `5 K. S
! [0 Y' I* Q' H3 E& ?( P7 \7 g* F0 F' d可以再做单酶切
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