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楼主
发表于 2012-11-5 11:13 |只看该作者 |正序浏览 |打印
不还意思昨天图片没传上来" [9 P2 h5 P2 h" _5 Q7 y
各位大虾帮我看看我的MSC出了什么问题,细胞核变大,过几天就死了,不知道是为什么?? 细胞第三代,应该还没老化吧?
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发表于 2012-11-16 15:29 |只看该作者
如果突然变成这个样子就要考虑培养基问题了,或者换液周期,加l谷氨酰胺,换血清。
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发表于 2012-11-16 10:17 |只看该作者
说不定是支原体污染了,我也有过这个经历,我怀疑是支原体污染。
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发表于 2012-11-15 09:57 |只看该作者
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我们实验室用的都是5%血清的MEM,培养出来的挺好的
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发表于 2012-11-7 10:56 |只看该作者
应该是细胞老化了  极大可能是血清浓度高了  我们用的8%的血清浓度时间长了也会那样的
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发表于 2012-11-7 10:22 |只看该作者
你换培养基了没有?如果培养基营养耗尽,不及时更换的话,细胞很容易出现这种问题。
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发表于 2012-11-6 22:35 |只看该作者
很明显老化了啊
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发表于 2012-11-5 14:29 |只看该作者
个人意见:+ R& r9 S0 l& |
1.不像是真菌、细菌污染,如果污染,细菌会增值的非常快,培养基很快就变色。如果是支原体污染,对细胞的影响不会如此之快。7 X, g, x# E4 N
2.细胞老化可能性较高。原因如下:
2 R$ d8 W" l* `$ w# l  p(1)培养基的原因。可能是培养基存放时间太久,保存方法不对。1 }+ R! d: {0 D: L1 o1 f
(2)血清的原因。血清的质量、浓度对细胞增值、生长有很大的影响。& I& p* E0 X$ V+ i
(3)培养的条件。这个原因其实不容易引起重视。因为很容易排除这个原因。只要看看相同条件下的其他细胞生长情况如何,比较后一目了然。
$ h& J( t* k( ?2 ^' m(4)细胞来源的样本的问题。细胞来源的样本质量好坏,直接影响后续的实验。这个确实会引起后面一系列的问题。不过这个概率较小。只有在排除其他的原因后才能考虑这个因素。比如实验细胞样本的取材、运输条件都会有影响。
9 j; \$ L1 \; i* w(5)操作者的处理。这个楼主要自己查看实验记录,回忆操作过程,检查使用的试剂是否有效,是否过期,胰酶消化、细胞接种浓度等操作。这个原因楼主要引起注意。
2 d! O7 k, _' p: Z1 J# e4 o! X: s# F以上分析,仅供参考。
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发表于 2012-11-5 13:43 |只看该作者
应该是老化了,你用的培养基血清浓度多少?
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发表于 2012-11-5 13:14 |只看该作者
细胞老化
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