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本帖最后由 弑之使徒 于 2012-11-5 21:52 编辑
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可能是我没有讲清楚吧!% i6 M. P. a+ ]- r) K7 R9 t, J7 `: H- [
方法如下:将脐带 清洗干净,剪碎至1mm 大小组织块后,将组织块转移至0.1%胶 原酶Ⅳ中,37℃持续搅拌消化30min,随即加入0.1% 胰酶37℃继续搅拌,消化30min中止,滤网过滤, 1500 r/min离心8min。弃上清,PBS重悬细胞,1500 r/min离心8min。洗涤2次,以MesencultTM专用培养 基吹打混匀细胞,调整细胞密度为1.0×10 /cm ,接 种于培养瓶中。, w7 a' ]0 H% r8 o; t" N
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2 _$ D9 o! {% f+ q- _' j" }& H# A我使用的时候都是用37°水浴消化脐带的,我唯一不明白的就是为什么4度冰箱放隔夜解冻的试剂消化效果要比由负20度转至常温解冻(或试剂直接水浴加热至37度解冻)的效果好?
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是温度相差太大酶的活性降低? |
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