
- 积分
- 57
- 威望
- 57
- 包包
- 245
|
本帖最后由 弑之使徒 于 2012-11-5 21:52 编辑
1 k! ~6 {# i( Z% `2 w+ Y! W' d
7 b7 p4 ]' s8 E$ V可能是我没有讲清楚吧!
3 b4 D9 S8 j$ W& f5 D* s方法如下:将脐带 清洗干净,剪碎至1mm 大小组织块后,将组织块转移至0.1%胶 原酶Ⅳ中,37℃持续搅拌消化30min,随即加入0.1% 胰酶37℃继续搅拌,消化30min中止,滤网过滤, 1500 r/min离心8min。弃上清,PBS重悬细胞,1500 r/min离心8min。洗涤2次,以MesencultTM专用培养 基吹打混匀细胞,调整细胞密度为1.0×10 /cm ,接 种于培养瓶中。% H2 Q L8 ^8 T7 B" ?
+ s& Q- A5 W) M$ D: M
d$ O/ K; [4 U' |3 \/ ?, o我使用的时候都是用37°水浴消化脐带的,我唯一不明白的就是为什么4度冰箱放隔夜解冻的试剂消化效果要比由负20度转至常温解冻(或试剂直接水浴加热至37度解冻)的效果好?
4 l5 [. B/ }4 c8 Z$ @6 R0 G# m
- ^# v% W. u2 i: F7 O1 J& L是温度相差太大酶的活性降低? |
-
总评分: 威望 + 2
包包 + 10
查看全部评分
|