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[请教] DMEM的pH   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2012-11-5 21:46 |只看该作者 |正序浏览 |打印
DMEM是常用的一种培养基,但是使用过程中会发现,随着时间的放置,pH会逐渐升高,最明显的就是指示剂酚红慢慢变紫。尽管配制的时候会加入NaHCO3和HEPES这种缓冲液,但是还是没办法。不知道大侠们有什么方法可以让培养基的pH维持在7.2的时间长一点,至少开瓶用后,在4℃能保持这个pH两周以上,谢谢!!
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发表于 2012-11-8 12:46 |只看该作者
回复 NK细胞 的帖子3 X# b: ^5 P4 _5 g

3 K" V# m" n  j4 C现在养MSC,碱的培养基不用了,不知道会不会有影响。9 R+ w/ L) B8 i  d* O
我们原来养Vero、MDCK之类的,很碱的也用了,感觉也没什么不同。
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小小研究员

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发表于 2012-11-8 10:07 |只看该作者
回复 NK细胞 的帖子) X$ p1 p, ~; g! c. G
5 l9 I) Q& H1 h
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
  g3 u. |# m+ C: N0 V. Y$ J( ~) f* i" A) N' ^7 w2 a
否则他会看不到

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发表于 2012-11-7 22:00 |只看该作者
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突然又想起一个问题,培养液变紫后对细胞有影响没?影响有多大?
0 k2 M, |' @/ ~' f) Z  d# P
7 E9 D% y- L0 T3 X( o2 v! E7 G
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发表于 2012-11-7 14:59 |只看该作者
回复 ljs 的帖子$ m/ a9 K; [0 Z- _
+ w6 n6 C+ r- N
顶  说的没错

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发表于 2012-11-7 08:30 |只看该作者
我们原来用dmem 加3g/l HEPES,很好啊,开用之后也不会像lz说的2w就碱,用挺长时间的。
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发表于 2012-11-6 19:56 |只看该作者
两周应该没啥问题,除非LZ开盖时间太长了,滤点HEPES,看到变碱时,加一点。用完封口膜封上。
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发表于 2012-11-6 16:16 |只看该作者
回复 wangzhiqi86 的帖子# ]8 O+ B( D6 Y  i- H

" k% Q# H+ L; R, L+ l1 x那你如果非要这么严谨的话,每次你买回来的培养基可以自己先分装成小瓶,培养基用的很快的,一瓶培养基不可能那么快就变碱,而且如果要加Hepes,基本上中间加一次,那瓶也就该用完了.           如果真的你的培养基频繁的偏碱,那你培养基用的也不适当,给细胞换液或者传代,培养基才暴露那么短时间,不可能那么频繁的就偏碱了.
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发表于 2012-11-6 14:33 |只看该作者
回复 wangzhiqi86 的帖子
. h4 i3 L6 G# k
/ b* a, a' R7 i" V$ @楼主拘泥于细节,忽略了缓冲剂的离子的作用,无论方法如何,看结果。
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发表于 2012-11-6 13:50 |只看该作者
回复 ljs 的帖子
6 m# B8 @1 g/ Q' l) T" {/ G7 h4 h3 h/ T9 K3 V' T
但是一旦开封,就往往意味着培养基的pH会慢慢升高,因为NaHCO3分解后,CO2就跑了,不知道你们实验室有什么解决方法没?谢谢
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