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[请教] 如何选择一抗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-11-9 16:43 |只看该作者 |正序浏览 |打印
大家好,最近要做细胞免疫荧光,我的细胞是鸡源的,准备购买一抗,目的蛋白是desmin。之前有文献是做鸭细胞的desmin免疫荧光,用的一抗是小鼠抗猪的。不知道我的可否用该文献中的一抗?& T$ v4 Y6 m/ I
浏览了文献所提供的一抗商家的网页,里边交叉反应物种中既没有鸡,也没有鸭,只有鼠、兔、猪。而鸭desmin蛋白序列与鸡的同源性为99%(鸭序列比鸡短150多aa,除这150aa外,剩余序列与鸡的只有1个氨基酸差异)。这是否说明鸡和鸭该蛋白的一抗可互用?
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专家 优秀会员 金话筒

地板
发表于 2012-11-12 11:27 |只看该作者
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( N( C+ R! k% l& M0 P' B3 T
6 q9 l# K* ^  G询问试剂公司,这个一抗的抗原为那段序列,和鸡的是否序列类似。
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报纸
发表于 2012-11-9 23:12 |只看该作者
请问是多抗还是单抗,要是多抗我觉得应该是可以用的,要是单抗需慎重!
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板凳
发表于 2012-11-9 21:24 |只看该作者
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1.完全赞同楼上的意见。楼主不能根据文献的做法来做自己的实验课题。你们的课题实验是不相同的。这样的做法也不是科学的态度。你这样即使做出来结果,可信度真的让人怀疑。) b. y% R; |5 \: k7 E3 r* z# u
2.抗鸡的抗体有很多,楼主不能凑合。请楼主慎重啊。如果你找不到鸡的抗体,我可以推荐一个美国抗体制作公司,www.Genwaybio.com,这家公司擅长做家禽类的抗体(我不是广告商,也不是中介,楼主及同学们别误会)。
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藤椅
发表于 2012-11-9 19:10 |只看该作者
抗体的选择在于抗原的表面决定簇,和序列同源性其实是两个概念。。最好还是用抗鸡的desmin的抗体。用别的很有肯能不能用, 或者星号很弱哦。。。。。
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沙发
发表于 2012-11-9 17:51 |只看该作者
高手请指教啊!别沉了……
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