请教啊原代的胚胎干细胞，在传代时，消化两分钟，成片状

辛西雅

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这一批原代的胚胎干细胞，在传代时，消化两分钟，成片状，像一层膜似的，不像之前消化的能均匀分散，不知是不是细胞有问题

xbs530515

操作都一样吗？换过胰酶没有，或者是胰酶时间有点长？
! E2 D9 B* m: [$ @( |2 G4 X* p1 \- X可以考虑重新配置胰酶，或者在胰酶中添加EDTA试试，

xiaocell

你做的是小鼠还是人的？消化的时间不够，或者是胰酶的效力不强了，你可以稍微吹一下。

zb_ming

胰酶消化不容易掌握时间，建议楼主采用物理方法传代，最要不要用胰酶。

辛西雅

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7 X  h3 u6 R* ?8 i& H
9 l6 P7 R/ c% N' P不是消化不下来，而是感觉像是消化过头了，之前没遇到这样的情况，胰酶是近期的，正常都是消化三分钟，不知道这次的原代有什么问题

辛西雅

回复 xiaocell 的帖子2 ~8 |8 @! Z! K# \4 |4 C

# d/ F) w9 B9 i8 o# ^. g" G/ |- l人的，正常消化三分钟后十字交叉能晃匀，可是这次的细胞消化下来连在一起成片状，吹打后还是很多不能分散，才消化两分钟应该不存在消化过度的问题

辛西雅

回复 zb_ming 的帖子
" _$ Z0 Y. e) D, ]  V( [
0 w2 n) d; ]. `8 W( j2 p可我们实验室一直都是用胰酶消化传代的，没用过物理方法传代啊, J3 g' C( f5 U

辛西雅

我注明一下，不是消化不下来，而是看着像消化过度一样，可关键是我才消化两分钟

lql2006wh

消化过了会有成团现象，很烦人，而且很难再吹散。9 e2 J& c/ W( f, }7 d
再确认一下胰酶溶度之类的吧; I' I& C$ p% Q, k! J
再有就是如果这次消化距离上次消化时间短的话，消化也会很快的

sandy

一般是胰酶的问题