DC成熟后是不是这样？不成熟的怎么处理！

wwxx66

大家好，DC培养了几天后加TNF-a促进它的成熟，问一下论坛的高人们，DC成熟后是不是开始有贴壁变悬浮起来了，收获DC时，吹打不下里的DC细胞是不是不是成熟的，这些不成熟的DC还有没有用？用不用细胞刮挂下来。

ljl1988115

没有准确的说法是用悬浮和贴壁来检验DC是否成熟吧，一般要看CD83的表达程度来决定DC是否成熟

天天天雨雨

DC成熟后是这样的，加TNF-a刺激成熟后后第二天就会悬浮起来，贴在壁上的悬浮细胞我们都不会刮下来，使劲吹打，吹不下来的就直接弃掉了。, N2 P; n& B, T; G" u3 B/ B
另外，并不能确定贴壁的细胞就是DC细胞吧,DC贴壁贴的并没有那么牢固。

kiss2346

回复 sunny.yc 的帖子0 N- l' n/ w. C$ H- X8 }

8 z7 e+ d1 A+ z; K  [) N6 ~$ |转速1200R/MIN  10min 就可以    一半都是能够收集多少收集多少，尽量多收集

sunny.yc

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4 H* F# `/ Q% c- P1 C( }6 D! i' e8 v7 I0 u6 ?7 ?
好的，十分感谢！！那你们DC细胞离心的话，转速和时间都一般控制在多少呢？

kiss2346

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, U" Q2 O$ t' p: T1 J+ |; R/ X. H) x" ~7 _6 ^* j8 @7 x
这个我不是很清楚，我们用的量比较大 所以一般都是用生理盐水来做   你说的那两种我都没有用过 不好评价

sunny.yc

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7 U5 Q9 B- ~4 X0 G) `! J, T" J3 [* b2 {; z
可以不用4度冷盐水，换做4度预冷的DPBS或者1640吗

sunny.yc

回复 kiss2346 的帖子$ `5 ^0 D: _7 t& b$ h

* A8 H) N. r, d$ X4 i可以不用4度冷盐水，换做4度预冷的DPBS或者1640吗

kiss2346

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# N- B5 Q2 M1 f7 G9 K  \
$ P; e, G9 [+ i& ~确实 通过形态判断不准确，一般而言也不会这么做。但是那些贴壁特别牢固，形状不规则的 基本上都不是DC了 ，那部分我一般都不要了 。既费时费力，而且还可能是杂质细胞

lyj-0017

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8 A9 W( b' p* _* _5 H
4 Z, k% g4 D$ I7 K( u$ @说实话，虽然我们都清楚DC形态具有许多树突，但是实际在用一般显微镜观察时，我们观察到的DC并不像一些图片上所画的一样，所以我认为单凭细胞形态标准来判断是不是DC从而决定要不要这部分细胞并不可取，倒是可以选择用无酶的冷的消化液多消化一会，再多吹打一会