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eley

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楼主

发表于 2012-11-17 20:24 |显示全部帖子

一般使用套环法和无限稀释法' t& E# h$ p6 D+ p5 \. j* x
套环法比较简单，可以去网上自己查一下。

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eley

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沙发

发表于 2012-11-18 20:51 |显示全部帖子

回复 your1024 的帖子
" m0 t' p! }7 p$ r
相差显微镜就可以，我们实验室平常是放在细胞房的，可是要挑单克隆的话，我一般放到安全柜里面照一会紫外，然后在安全柜里面使用，这样有点麻烦，可是避免污染。, W ~' m# t, T* A# U# ?; l! }
. C' |5 Z* a7 k; _4 o" c( z
最近做了一次，觉得阳性率挺高的，所以就直接用无限稀释单克隆方法了，希望对你有帮助。

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藤椅

发表于 2012-11-19 10:55 |显示全部帖子

回复 your1024 的帖子$ h7 U( {! Z* [8 B9 @, O

就是计算好细胞的数量，然后用培液稀释，分装到96孔板里面" W; a* J5 ] E9 f: a! U
保证每个孔板的细胞数量是1个就可以了， [/ N* }' b/ Y1 a" w
等细胞长成菌落之后，用抗性去筛选，然后得到的单克隆就是比较好的阳性克隆了