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楼主: rongcuizhen2005
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[请教] 液氮罐内冻存细胞是否会污染?   [复制链接]

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发表于 2013-2-2 17:43 |只看该作者
肯定是冻存前污染或冻存的过程中发生污染,在液氮中污染的可能性非常小。
; j+ {5 n. [. b, r' ?6 y. F4 z# v: ?也有可能是冻存管没有拧死,在复苏时水进去了。。。
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发表于 2013-1-31 14:16 |只看该作者
回复 予彦 的帖子0 _: }0 x3 y/ n. M
- @- N, e* r9 S' S  q
DMSO是两性溶剂 亲脂也亲水 我们也是0.22uM孔径的滤膜,注射器推进快速过滤
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发表于 2013-1-29 11:54 |只看该作者
之前我们也有过这样的情况,冻前有检查,无污染,可拿出来后,未经水浴锅解冻,直接检查还是有污染,目前这种液氮罐的冻存模式还是需要很大改进啊。
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发表于 2013-1-29 11:17 |只看该作者
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回复 monk125 的帖子# O$ @$ I1 K& X5 T# N

+ y& l9 f: ^( g- K4 z3 m请教你是用什么过滤的?我用0.22的滤膜,感觉DMSO把滤膜都要融完了,后面像自来水管一样漏,都没效果
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发表于 2013-1-24 15:47 |只看该作者
液氮这么低的温度,有污染也不会传播。

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发表于 2013-1-24 14:41 |只看该作者
回复 rongcuizhen2005 的帖子7 F5 x# f3 h& `/ g; A  K( @* F

6 t7 V8 D/ n6 b* L我试过 , 可以过滤的,严谨讲,用于冻存的DMSO应该过滤,否则有危险
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发表于 2013-1-24 14:40 |只看该作者
细菌真菌什么的-100度以下都会死掉的 唯独支原体 你懂得!!!! 这个问题以前讨论过的, 有可能的,所以冻存管盖子要盖好!!液氮也是污染的媒介,本来灌进去的液氮可能都很脏的
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发表于 2013-1-24 13:54 |只看该作者
回复 rongcuizhen2005 的帖子* _5 b4 C" M7 ]3 g$ E6 b$ E) U- V
* u- L0 J; ]) f( S' Z
我们实验室的冻存液是过滤后用的,血清过滤,DMEM过滤,DMSO过滤,混合到一起后避光4°备用。个人认为,液氮罐内的污染不太大,但有这个可能。更多的是冻存过程中操作引起的污染,或者复苏。水浴锅的水一定要经常更换。。。
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发表于 2013-1-24 13:31 |只看该作者
冻存液有问题的可能性大,还有就是复苏时的操作都有可能污染。我们经常冻存、复苏细胞,基本没污染过。水浴锅也不能排除。如果你能排除不是细胞冻存之前就污染的话,你就从以上原因找。至于过滤冻存液的问题,我们是从来没做过。其他也很少有人做。所以,还是从你的自身找原因吧。

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发表于 2013-1-24 13:30 |只看该作者
冻存液有问题的可能性大,还有就是复苏时的操作都有可能污染。我们经常冻存、复苏细胞,基本没污染过。水浴锅也不能排除。如果你能排除不是细胞冻存之前就污染的话,你就从以上原因找。至于过滤冻存液的问题,我们是从来没做过。其他也很少有人做。所以,还是从你的自身找原因吧。
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