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保存在4°C隔夜的血液还能不能做CIK? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-11-27 16:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
保存在4°C隔夜的血液还能不能做CIK?细胞能不能长起来,细胞有没有活力?尝试了一下细胞长得特别不好,有没有高人提供建议,针对这种情况有什么好的对策吗??
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沙发
发表于 2012-11-28 08:35 |只看该作者
只过了一晚,目的细胞会损失一部分,但是还是能分到大部分细胞的,能养起来
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藤椅
发表于 2012-11-28 08:45 |只看该作者
常温保存试试看?
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板凳
发表于 2012-11-28 08:53 |只看该作者
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这个。。。依照我们目前做的,来了血液最好马上处理,不要时间太久,过了夜的更不好了。我们这边两个实验室一个做CIK总是养不好,后来问我们才知道他们的血过夜了,而我们都是收到血就开始做。不知道由于血放时间长了而造成的这种情况如何改善。。。但是能不放过夜就别过夜吧
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报纸
发表于 2012-11-28 09:12 |只看该作者
最好处理新鲜血液,因为本来肿瘤病人的血液在培养中有的就有难度,4℃过夜会导致你分离得到的目的细胞减少,细胞活性降低。
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地板
发表于 2012-11-28 14:26 |只看该作者
最好采了血就立刻制备分离,如果过夜的话常温肯定是不行的。还有你所谓的过夜是多长时间呢?超过12小时,单个核细胞的回收率就很低了,活率也会下降的。建议这种情况下提高初始培养密度试试。
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发表于 2012-11-28 15:13 |只看该作者
回复 wwxx66 的帖子3 R5 f4 V5 I1 c' B+ X7 x
# `# a% P# x  {
做细胞就是不能停下来,时间到了该处理时就得处理。如果是你们自己采集血液,那么采集到血液之后就立刻带回实验室进行分离然后培养,我们原来就这样,如果回到实验室在下班时间前后那么就先吃饭,然后就分离细胞,最晚干到过凌晨一两点。如果是因为别人的原因,自己不能控制,那么试下加点PHA,只加一次,少量的加。
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发表于 2012-11-28 15:54 |只看该作者
多谢各位指教,我这种情况是由于主任不了解情况擅自做主:下午4点采集的140ML新鲜血液,放在4°C中保存了一晚上,第二天八点开始分。整个培养过程细胞就不怎么生长,生长了以后就是细胞没有活力,培养液特别的红!!
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发表于 2012-11-30 11:50 |只看该作者
不建议用隔夜血做培养,细胞活力会下降很多的。% i( d8 g6 S: P5 G; j2 S4 X
即便养出来了CIK,如果后期实验结果出现异常,也不好分析原因啊。
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