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标题: CIK细胞的回输问题 [打印本页]

作者: wjp130 时间: 2012-12-10 10:48 标题: CIK细胞的回输问题

每次回输的CIK要达到9次方，这么大的细胞量，悬浮到250毫升的盐水里面很容易聚集，做过实验，用羟乙基淀粉，血浆，不同的比例都试验过，放置半小时，都会有细胞聚集，应该怎么样防止细胞聚集呢，请大家发表意见，呵呵

作者: meixue1130 时间: 2012-12-10 12:59

我们这边做的CIK，每次回输细胞数量也是达到10^9的啊，短时间内细胞悬浮得还不错啊，我们一般会在盐水里加人血白蛋白，浓度为1%。

作者: hwlightning 时间: 2012-12-11 08:09

我们回输都有10的10次方，用200ml生理盐水加5ml人血白蛋白，5 w( z, g0 d4 o- ~
细胞收集的时候要混均匀，有的时候出现聚集也正常。回输的时候用输血的输液管（带滤网）就OK了。

作者: cheeray 时间: 2012-12-11 11:12

对。。加5ml 白蛋白。。加自体血浆也可以

作者: wjp130 时间: 2012-12-11 15:39

回复 hwlightning 的帖子8 e- l' [0 y& I
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在回输细胞的时候出现絮状物，你给患者怎么解释这个问题呢，再者，絮状物里面的细胞，是死细胞还是活细胞呢，如果是活细胞，能不能吹散再输

作者: stang198651 时间: 2012-12-11 17:16

回复 hwlightning 的帖子- B8 h0 t7 t3 e" d1 ^3 n5 v

你们回输的10的10次方细胞离心下载在离心管里有多少体积？上面哥们9次方细胞，250毫升生理盐水很容易聚集，你的10次方，200毫升生理盐水，密度更高了10倍左右，真的很少聚集吗？

作者: yinfuhua 时间: 2012-12-11 22:21

加入上述浓度的人血白蛋白，确实可以防止细胞出现凝聚现象。行之有效。

作者: drxia 时间: 2012-12-12 00:51

每次回输细胞（80-100亿）用200ml生理盐水稀释并加入2.5克人血白蛋白（20%的制剂），这时的白蛋白起到稳定剂的作用。3 s' d# g) _( P' E6 g9 m
回输时需要用一次性输血器（带滤网）。一般很少出现絮状物，如果出现絮状物且摇不散的话，很有可能有真菌或支原体污染。

作者: hwlightning 时间: 2012-12-12 08:15

回复 stang198651 的帖子

有的病人细胞会出现，但是数量不多。回输的时候用输血器回输就不用担心这个情况。% z+ Z. y4 @" e) X$ L7 N8 K/ A

作者: hwlightning 时间: 2012-12-12 08:19

本帖最后由 hwlightning 于 2012-12-12 08:20 编辑 - N: H: y% k; f$ Y; u
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如果出现絮状物的话，你可以把制备好的细胞放在显微镜下观察絮状物是什么样子的，不一定是微生物污染。
吹打细胞得移液管上不是也经常会出现一层薄薄的膜，那时候就不要吹到你收集的细胞里面。) b- c Z7 W; r( H$ K) @
实在如果还不放心的话，那就用快速试剂盒检测下内毒素。

作者: hwlightning 时间: 2012-12-12 08:24

回复 wjp130 的帖子/ E( ?" r. T. e, w K# f

如果出现絮状物的话，你可以把制备好的细胞放在显微镜下观察絮状物是什么样子的，不一定是微生物污染。' x- Y2 F; H& X8 K" ~6 P- t, _: _
吹打细胞得移液管上不是也经常会出现一层薄薄的膜，那时候就不要吹到你收集的细胞里面。
实在如果还不放心的话，那就用快速试剂盒检测下内毒素* v/ i" v. Q' h# W+ Q* X
如果再确定不是微生物污染而又有很多絮状物的话，你可以试试细胞筛。BD公司有卖。

作者: labspring 时间: 2012-12-12 15:05

我们实验室最开始也有这种情况，用细胞筛过滤一遍，加入人血白蛋白，就没有发现凝集现象了。为了节约成本，慢慢做下来，发现吹打均匀后不用细胞筛也可以，白蛋白的量也可以自己慢慢摸索着减量，但输液的时候还是要用输血器回输。

作者: jingbocn 时间: 2012-12-21 22:11

我们用的cik是10的9次方，加到100ml生理盐水内，1%的人血白蛋白，絮状物很少。

作者: chenguangyu 时间: 2012-12-27 11:23

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我们回输10的10次方，用100ml的盐水，加1%白蛋白，要先加一部分生理盐水，然后加白蛋白，吹打均匀后在加到100盐水瓶中，没问题，凝聚很少很少

作者: kiss2346 时间: 2013-1-7 08:35

这个问题我们也遇到过，不过这面一般出了细胞一个小时内就回输了。技术标准不是我们自己说改就改的

作者: ljl1988115 时间: 2013-2-26 11:20

如果回输时间没有延误的太长的话不会出现那么严重的细胞聚集吧，至少我们在加了1%人血白蛋白后2H内回输没有这个问题

作者: yizuiqiannianga 时间: 2013-4-3 16:20

回复 wjp130 的帖子

絮状物就是死细胞了，如果活细胞就是像一层沙子似的，稍一晃动就会散开

作者: yizuiqiannianga 时间: 2013-4-3 16:21

絮状物是死细胞DNA之类的出来了

作者: wenwen1228 时间: 2013-4-17 20:43

收集完细胞马上回输的话一般不会聚集。时间长的肯定得加白蛋白啊，不然细胞结团，时间长了会死。

作者: lwr002 时间: 2013-4-18 17:20

回复 hwlightning 的帖子# V) { k' ]: A8 m

回输一次10的10次方，你们一疗程回输多少次呀？采血量是多少？多久回输呀？

作者: hwlightning 时间: 2013-4-19 09:00

回复 lwr002 的帖子, d# B5 P$ D' w) n7 n8 f
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一次采血两次回输，采血100ml，一般15天左右，这得根据病人的自身情况来。

作者: weijunning 时间: 2013-5-8 16:11

为了防止回输袋中絮状物的出现，一定要掌握以下几点：' e: I' {7 Z- h* u! o& L
（1）离心洗涤完毕的细胞，一定要拍打均匀后再注入回输袋。+ F* p9 b7 h. ~% g. }
（2）往回输袋注入细胞时，一定要缓慢注射。
（3）回输袋中加10%HSA，以维持细胞活性，减少成团现象。
（4）制剂完成后建议2小时之内马上回输；对于马上无法回输的制剂袋，可以放在4摄氏度冰箱里储存，低温减少细胞的新陈代谢，防止死细胞成团。4°C也不易长时间放置，不能超过1小时。

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