肿瘤细胞球表面抗原分子检测

妮妮

我养的MCF-7肿瘤细胞球，现在想检测一下表面分子CD24和CD44。用流式细胞术进行检测，想请问做过这类实验的实验组、对照组该如何设置。对照买的是同型对照

wanyinghl

我们做的是对照组是用空白对照、单阳性对照、同型对照，前两个对照用来调试仪器用的，当然如果特别熟练了，就可以不用前两种了，实验组是用CD24-PE,CD44-FITC标记的肿瘤细胞。我们用的抗体是国产的，一般来说，检测用也行了

妮妮

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1 V7 }: n% O( n% J1 p想请教一下，这三个对照分别是什么作用呢。单阳性对照是只加CD24-PE或CD44-FITC吗？

wanyinghl

空白对照是没有标记抗体的的样品细胞，在上样时先检测这个，可以设定各个通道的电压，标记阴阳性分界线，等等调试仪器的，一般是用来做预实验的。单阳性对照就单阳性对照是加CD24-PE或CD44-FITC的对照，为了排除这种抗体是否有效时设置的。一般来说这种如果做熟练了，可以不用，同型对照是常规的阴性对照，也是必须的。正式的流式图数据都必须建立在这种同型对照基础上

妮妮

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非常感谢！

eley

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3 z" I- d# }5 p3 J1 J! M
+ z% w) c( \1 Q: \, I什么是同型对照啊？？谢谢~~

wanyinghl

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$ o# [* [; N: |8 G# a同型对照是为了排除在流式中所产生的非特异性荧光所设置的一种阴性对照，是一种与实验染色的单克隆抗体特异性无关的免疫球蛋白亚型，与染色的单克隆抗体 相同种属来源、相同免疫球蛋白及亚型、相同荧光素标记。这也是选择同型对照的方法。
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eley

回复 wanyinghl 的帖子8 q; {* E, y, U# L6 w. L* @

1 a- _7 v0 G% o! }$ H可不可以认为是IP的时候用的control IgG？

小木梅

回复 wanyinghl 的帖子- Y3 Y. i/ a' c% F8 j

9 H% W5 U' b0 V9 z请问买的哪家公司的呀？