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求鉴定EPC [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-12-17 22:26 |只看该作者 |正序浏览 |打印
attachimg]48301[/attachimg]养EPC3个多月了,真是折磨啊,请大侠们帮忙看看这是不是EPC啊,标记的是CD133,CD34和VEGFR2,流式结果总不满意,想请教下有经验的战友们为什么出现集落了,用这三个标记后阳性率没有文献上那么高呢?(大致步骤是第七天细胞消化后洗两遍,加抗体,孵育30分钟,PBS洗两遍,1200转6分钟,定容后拿去上机,注意避光了)内皮祖细胞上述三个标记物单标流式应该如何设门?下面是第五天和八天的细胞照片,不同批次,请高人指教啊!小女子感激不尽!!' p( V2 ]/ S- M: Y; w4 W
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发表于 2013-4-12 12:05 |只看该作者
回复 圈圈d圆圆 的帖子4 a' ^3 y) v  V% b- B7 |# v: |
4 o( l/ y3 L( }
文献是指哪篇?能给文献看看不?您现在做到哪里了?

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发表于 2013-4-4 23:38 |只看该作者
另外做下免疫荧光,内皮细胞内吞试验等

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发表于 2013-4-4 23:37 |只看该作者
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就是不要吸得太过头了,细胞全都洗没了。

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发表于 2013-4-4 23:37 |只看该作者
还有吸取上清时应该注意,宁多勿少!

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发表于 2013-4-4 23:36 |只看该作者
看你流式的细胞数够不够,达没达到10万个细胞?

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发表于 2013-4-4 23:36 |只看该作者
孵育不需要这么长时间,10分钟就够了

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发表于 2013-4-4 23:35 |只看该作者
加抗体的体积比是多少,是100ul吗?

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发表于 2013-4-4 23:34 |只看该作者
强烈建议你把跑流式的步骤仔细的列上,看看有没有小的细节你没注意到?
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发表于 2013-4-4 04:30 |只看该作者
组织来源很重要。哪里来的?
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