试做胎盘干细胞 求助

xiaolu19781999

酶消化培养法􀀁 剪碎后先使用胶原酶IV$ A5 J$ l6 _% s
37 􀀁 消化30min, 再用胰蛋白酶消化10min, 反复吹
& b- m$ e  I& F$ a+ x/ b7 X  e打使成单细胞悬液和外植块混合物, 200 目滤网过
# i( A+ A1 N8 e滤收集单细胞, 小心置于淋巴细胞分离液上, 2 200 r􀀁4 b- c6 s: h4 K. S0 F
min 离心15min 获得单个核细胞, 以1 􀀁 106 个􀀁ml 的
* j9 E4 x2 p' |: o" {, e& Z& h密度悬浮于低糖DMEM 培养基中( 含15% FBS, 100
. k2 \# D# U& A# c, nU􀀁ml 青- 链霉素) , 置37 􀀁 、5% CO2 和100% 湿度8 u4 s7 ^" Z/ N3 g7 f$ i* _/ M2 l
培养箱培养, 随后每3~ 4 d 换液1 次, 经3~ 4 周可* J- [6 J& R5 y
见成纤维细胞在瓶底汇合成片。约到80%汇合时用) A% A! G" A6 ~4 m' r# H* X
0. 25% 胰蛋白酶消化, 以细胞密度5 􀀁 104 个􀀁cm2 传1 R* r$ E$ g) ~4 I4 h3 Q1 U4 p
代培养; + Y: k3 s7 z! e* i7 l
用这个方法试试