求教大家软琼脂克隆怎么染色？

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尤其是用结晶紫的话。结晶紫粉末怎么配溶液？染到琼脂上时琼脂背景也都是颜色，洗也洗不掉，应该怎么操作呢？( m2 q0 ]& S0 I- L8 k- h
有做过的人帮忙解答吗

570505

另外，计数怎么计？细胞在软琼脂里很难计数啊好像

daviddow

0.1%结晶紫啊

daviddow

那么大的一个球应该很好计数啊

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回复 daviddow 的帖子
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请问您确实是用结晶紫染过软琼脂克隆吗？加完结晶紫如何洗脱呢？您能否解答详细些？

daviddow

When colonies were large enough to be visualized, 0.01% Crystal violet was used to stained it for 1 h. colonies were counted under inverted scope by two persons.

daviddow

对不去，上次说的是是0.1%结晶紫，这次看了后是0.01%。真是抱歉。这个文献应该有很多

570505

回复 daviddow 的帖子: {" E8 B% S& o( V  C" @* }

' o* s& J6 t/ b6 w! t: |好的，谢谢。要染一个小时那么久？然后能把背景洗脱干净吗？

daviddow

我还是几年前做的，现在具体的东西都忘了。你可以同时做几个样本，先拿一个事实啊。反正做一个和几个没啥区别。

shqinzhu

我们一般是用MTT，10min,不要加多了，染后不需要洗，本来培养基如果加了酚红的话就本来就有颜色，所以不需要洗。显色后克隆在平板上感觉是黑色的。拍照慢慢数就是了。