关于NK的讨论

ljl1988115

不知有没有做过NK细胞的同学，不知道大家是怎么养的？希望做过的同学能解答一下，我看文献上有用滋养层细胞的，不知是什么情况，有做过的讨论一下吧！

wwxx66

国外做的很多都是用饲养层细胞养的，K562细胞经基因工程改造，可以表达一些膜分子，在膜分子的的作用下，NK细胞可以大量的增增殖，最大扩增倍数可达到21000倍！国内也有很多专利讲到这些东西。你可以去国家专利局网站上查找。

weijunning

可以不用饲养层；选用德国产的一种用于NK细胞培养基（比较贵，2000元/瓶，500ml/瓶），选用关键细胞因子IL-2，OK432，可以进行很好的NK细胞培养。

永远的伊凡

回复 weijunning 的帖子
! C8 D! s- E2 s6 o5 o  u7 G
/ j$ x1 y% z, c3 A能不能讲具体点呢，像需要加的因子的量、加的时间先后等等

yangpan521

回复 weijunning 的帖子
0 ~0 {2 v4 R7 D  d, j5 x
2 Y4 x0 e( q$ |1 W5 p7 G( q能不能发一些相关的信息呀，比如饲养层的选择、因子的浓度等 最好有相关的文献 谢谢

weijunning

回复 永远的伊凡 的帖子
3 n7 c2 M6 v+ n/ h" Z0 F
1 }+ ^. b2 A, T$ |1 T2 xOK432有配套的溶剂去溶解，1g用一支配套的溶剂去溶解就行，配出来的是1000X母液；需要铺细胞当天加；IL-2的工作浓度为1000ug/ml  在当天加；之后扩瓶培养基只加IL-2因子就行。

永远的伊凡

回复 weijunning 的帖子
1 i  E5 W9 |& X8 C$ \0 Q% Z5 R
( K2 j$ i! [" X/ C! ~( L  M+ S很有用，谢谢！

zhenhuale

回复 weijunning 的帖子
  e0 n* t0 U3 |
7 ~, Y$ J/ t/ r1 x( J: n2 D我用德国的培养基和OK432都试过培养  有文章也报道过该种培养方法: P7 G0 _9 w+ y* u! R3 f: }/ |
但是培养效果不理想，请问您培养多少天可以得到多少的细胞量，CD3-CD56+比率多少？谢谢！

weijunning

回复 zhenhuale 的帖子
7 A0 _2 d2 m6 w+ m* ~# t8 K5 A( t' u& K
我们正是用此方法培养的NK。一般在第10天才开始进入快速增殖期，之前增长比较缓慢；由于其对数生长期滞后，回输我们定在第15天，这时细胞数能达到2.0X109左右。CD3+CD56+一般在35%左右。

ljl1988115

回复 weijunning 的帖子5 P1 Y9 m- P" [" U
  G6 f7 a1 ~* K
NK的表面标志抗原应该是CD3-，CD56+吧，双阳的话不就是NKT了吗