慢病毒感染感染过后细胞怎么成这样了？

wangshumin12311

请说明你是小鼠还是人的什么细胞，另外你最后两张图看上去没有feeder呀，，，，

wangshumin12311

首先，你的feeder很稀，我几乎看不到你的feeder，feeder的汇合度差不多在90%左右是比较合适的，此外细胞也不能在feeder上种这么多，feeder上通常中2-10万细胞（10cm盘），你这个如果是10cm盘点话，起码有三五十万了（最后两张）。另外慢病毒的细胞毒性会较大，给予的建议是：降低感染的病毒量、使用高密度无feeder诱导重编程等方法。

wangshumin12311

忘了补充，feeder需要包被gelatin，无feeder诱导需要包被Matrigel

wangshumin12311

没错是使用BD的matrigel，不是我采购，不太清楚货号，5ml配200倍稀释的可以配1L，足够你用一年的了（200倍稀释包被时间长一些，2h以上），死的多另外的原因是感染后不要立马换KSR medium，需要用DFBS medium养一段时间，或者使用E7一段时间，或者其他的培养体系，慢病毒的毒性的确比逆转录病毒大一些，多做几次找到合适的条件就好。