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zhangjieyctc

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优秀会员小小研究员积极份子帅哥研究员

楼主

发表于 2013-3-28 15:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

最近几份胎盘干细胞消化不下来，不知道什么原因？以前消化2分钟就OK了，现在消化5分钟还不能全部消化下来，消化下来的成团细胞，吹散不开，是因为消化过度的原因吗？

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金话筒优秀会员

沙发

发表于 2013-3-28 18:43 |只看该作者

1、以前可以消化好，现在不行了？你需要查看一下你的哪些条件变了？是试剂变了或者试剂批号变了？试剂过期了？温度变了？等等
2、细胞成团吹不散可能是有些细胞裂解了，其中的DNA物质释放出来，造成粘连成团。可以加点DNA内切酶试试，浓度记不清了，需要自己查。

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labspring

新手上路

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藤椅

发表于 2013-3-29 15:21 |只看该作者

以前能消化下来现在不行请多思考实验条件的改变。操作步骤跟以前一样的话试剂是不是有了改变？
细胞成团打不散：1.  皿不能种太密才收获，一旦形成膜一样的细胞就很难打散2 t& D* Q2 I3 k
            2.  加入胰酶后不需要马上剧烈震荡，胰酶消化有时间过程，1-2分钟细胞会自动上浮8 Q1 @; y1 P# m+ ]  F: @* y/ t
            3.  如果可以的话在加入终止液前先吹打一下