间充质干细胞传代问题

zhang861006

脐带间充质干细胞干细胞特性一般能维持到第几代？胰酶的消化次数会影响其干细胞特性吗？

老姜

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３０多代仍保存ＭＳＣ的特性。传代胰酶用量尽力的低，但胰酶消化效果好，尚未见脐带ＭＳＣ传代用更高档的酶消化，也没见胰酶消化与别的酶消化效果的比较研究。

zhang861006

谢谢，再问一个细胞传代的问题，假如细胞一代，我一传十进行传代，那养出的细胞是第二代还是四代半？

老姜

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8 H& z' r/ V, B( S( w9 O& p
" p3 }9 ]6 t0 @) y: n目前文献上传代以消化一次定义为传一代，实质这一代细胞生长期间有的细胞会扩增几倍（快增殖细胞）——即已生长了好几代，而有的细胞却扩增１－２代（慢增殖细胞），这是不均一的。

zhang861006

谢谢，那你的意思允许消化30余次，还能保存干细胞特性？

youlesi888

胰酶的消化次数会影响其干细胞特性   一般来说能保证10个倍增数就非常好了  我做过实验

youlesi888

胰酶的消化次数会对细胞表面的特征或多或少有影响，建议使用Accutase 比较温和 5 t  u' Y; C5 a9 `

老姜

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! L! U0 e) B: C; D6 `7 b
9 E' c# C8 k$ t3 |# W: r* ~2 N% s是可以的，关键血清的质量一定要好。另外，传多少代是根据课题内容而定。临床研究用3-6代的即可，因为生物细胞临床治疗超过7代细胞变异的概率高一般就不敢用了，相关研究大于此代意义不大。生物细胞基础研究就可以传N多代进行研究，从理论上讲可能传代多的细胞各种功能会降低。

weibin2002

研究中一般都认为胰酶消化一次计做一代，但是如果传代太稀，会影响细胞的活性。& @1 T! h" a% P: q( }9 f: O
胰酶浓度和时间正常使用，应该对细胞影响不大吧，以前没太注意这个问题。