脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

老姜

回复 henryjia 的帖子
& h) h) x7 \7 K' ~. {) i4 a, N& |- i3 J
脐带间充质细胞是经流式、分化潜能、粘附性等间充质干细胞的实验研究证实具有间充质干细胞的特征。但是它诱导分化成功的时间（无论是成骨还是成脂细胞）远远长于人骨髓。骨髓细胞是成人体细胞，脐带间充质细胞毕竟更接近"胎"细胞(这样说不准确，但好理解)。也可以理解为它的细胞阶段多为早期祖细胞，也就是更接近干细胞阶段，将此诱导成为成熟的骨细胞或脂细胞“走”的时间要更长；骨髓细胞多含接近成熟阶段的祖细胞（典型的例子，机体一缺血，造血祖细胞立即启动分化为成熟血细胞以补偿失血），诱导成为成熟的骨细胞或脂细胞“走”的时间相对要段些。这也是我验证后的经验。分享!

老姜

回复 henryjia 的帖子
3 j( Y4 g' z/ O  |; [) G' V  Y* d6 H! x- P3 `  Z1 i) g4 h& H$ Y; r( ?
分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

回复 henryjia 的帖子
/ W8 v8 n, Z+ Q' |9 {4 A
" W8 c! ]4 B$ j( D. o/ A脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；- Y2 I8 H$ y4 ]6 F& m
成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

老姜

回复 henryjia 的帖子. Z3 l1 T! m6 A" e$ I! U
7 E  P/ K, i7 q, b0 w4 c3 O' x
成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
6 a8 g6 a7 H# Q7 b* ?: h成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。