成骨分化茜素红染色

xingyuncao

各位，间充质干细胞诱导成骨分化后，茜素红染色鉴定，在文献上看到用的是0.1%茜素红-Tris-Hcl（PH 8.3）染色的，Tris-Hcl的pH值很关键吗？最适合的pH应该是多少啊？我们实验室没有pH计，不能调的那么精确，问题大吗？

老姜

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: H2 \1 ?. \3 }8 v
可用1M的HCI调节PH4.2，染出的颜色更红。

wangzhiqi86

其实没有那么关键，直接溶解茜素红，固定细胞后染色即可

cuizhuzhu

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我的染液是去年配的，一直放在4°。放了半年还能用吗？

wangzhiqi86

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: X4 U( ?2 k8 D2 n4 h) ]! j没问题，我的染液配了半年，放常温，也一直用着没事

cx4236850

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4 m9 l7 a! z1 O5 n1 i! B: E不太赞同楼上观点，PH值直接影响最终染色的颜色，颜色不对人家都不承认你是不是钙结节的，这个这么好配的，花一点时间就配好了，做了这么多天的成骨诱导，在这个简单问题上贪小便宜，不值得，我们都是现配现用，别徒劳无功吧

lipd09@mails

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+ g9 w2 p% [; l; e7 d" i$ G茜素红染色我们经常做，我们是称取0.5g茜素红S加50ml ddH2O充分溶解，加入200µL~500µL氨水调PH值约为4.2。茜素红S溶液易和盐离子形成沉淀，在染色时要用 ddH2O漂洗。

liluoshushu

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3 ?0 u$ O1 K0 [8 w请问一下，我在网上看到一些配置的方法，说要调成PH8.6，你能再详细说说你的配制方法吗，“200µL~500µL氨水调PH值约为4.2”这里好像出现乱码，谢谢

lipd09@mails

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* D" B3 x/ k7 J6 F+ U我们是做的PH4.2的，染色效果挺好的。另，您看不清的地方是200μl~500μl的氨水调PH值至4.2。

liluoshushu

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# [3 x0 ^" p; y/ W2 ?, H请问一下，你们染色是直接孔板里染色么？我们消化了一次重新种在玻片上才染色的，不知道这样会不会把钙结节冲掉？