培养CIK，你用几个培养袋？你的细胞数量是多少？

wwxx66

培养CIK，一个病人你用几个培养袋，你们的培养体积是多大？你的细胞数量是多少？欢迎大家参与讨论。怎样既节省耗材又能达到细胞数量？

wwxx66

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2.2L长不到500亿细胞，用一般的培养基/551就可以，2.5L左右，14天下来能培养到100亿细胞。你说的500亿细胞，量太大了!

lyj-0017

回复 weijunning 的帖子1 P7 d+ Y. [# n* M/ P4 U
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那我明白了，应该会加retronectin、PHA和抗CD28单抗之类的一些因子吧，这样的话成本会高不少吧？如果降低成本用国产的，估计细胞培养的效果也应该不会太好

weijunning

回复 lyj-0017 的帖子6 j. m3 i" S4 n: C( z  I

" m; `5 s. Z& F0 a, h9 O我们因子的种类加的多一些

lyj-0017

回复 weijunning 的帖子# A% B" R9 }( x3 F

% Y; L7 Z% N. z; Y4 K0 `+ Q5 c你们的外周血方案是按照经典的那种培养方式，也就是D0加IFN-r，24小时候加CD3单抗和IL-2吗？

weijunning

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你说的没错，我们初识铺的培养基也就10ml左右的样子，一般在瓶中培养3~4天，就会达到108，这时按照1X106/ml转袋，将细胞放入培养袋中进行培养。最后回输时，基本上单次都能达到109.
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lyj-0017

回复 weijunning 的帖子1 L; i4 H+ K1 a8 P
3 L+ i: s0 g4 ]* C2 p0 Z0 B
如果是直接采集50ml外周血，按照分离得到2X10^7个PBMC，且铺瓶密度按照1.5-2X10^6/ml来算，初始培养基量也就是10多毫升的样子，按照这样的培养方式，培养一次最多能达到多少CIK细胞呢？

weijunning

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1. 我们一般直接静脉抽取50ml外周血，这样得到的细胞量是非常少的，顶多2X107个PBMC。如果是使用采血仪进行外周血单个核细胞采集，那采集到的PBMC是很多的，一般是109个细胞。
$ `  X) I' ^9 E% K' @4 \2. 我说的铺瓶密度越大越好，只是针对我们直接静脉抽血外周血提出的PBMC。对于机器采集的PBMC，初始铺瓶2X106/ml.
& v( B; a& x7 N8 p! I& F0 ^3. 我们对直接静脉抽取的血样和机器采集的血样，进行细胞培养的SOP是不一样的，加因子顺序也是不同的。+ t+ A# ?( ?$ _# C; H+ W6 [

momoenn

也得考虑初始接种细胞数吧？

lyj-0017

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将这些絮状物吸走后，对初始细胞密度没影响吗？