关于冻存

江如练

不知道各位冻存ADSC的时候冻存液的配方是什么，是只用血清么

倔强的投手

用培养基和血清都可以，10%DMSO

江如练

回复 倔强的投手 的帖子0 F2 y, w' |! `- f! q7 |; Z

, R2 G1 a1 @$ |% M, e4 F这样啊，以前用培养基血清DMSO 6:3:1，然后细胞都孵不出来，都死了，这样怎么回事呢

huangcong1988

我是用纯血清，加10%的DMSO，但是现在也遇到一个问题，就是细胞复苏不起来，基本不贴壁，我用程序冻存盒冻的，之前复苏过，很容易复苏起来，现在却怎么也复苏不起来，而且好几种细胞都是这样

supercell

回复 huangcong1988 的帖子. b6 E" d2 m& D
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冻存方法无大的问题，我想问题在你的冻存环境，如MSCs长期冻存在-80冰箱活性会有影响，如不是，那可能考虑你的液氮罐密封性的问题。

supercell

回复 江如练 的帖子1 w  d  Z; ^% h

* a3 o& d0 O4 r8 \, L2 U/ j培养基血清DMSO 6:3:1或者血清：DMSO9：1都是可行的冻存方式，如果细胞复苏活性差，有可能是冻存条件的问题，也有可能是细胞质量的问题。细胞质量包括你冻存前细胞的密度和是否过度消化。此外，不会有其他原因。

huangcong1988

回复 supercell 的帖子) C$ j: [8 M, O0 B) z
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纯血清：DMSO冻细胞是真不行，我试了，纯血清冻的细胞不能复苏起来，都是用冻存盒冻的，但是5:4:1（血清：DMEMMSO）的可以

supercell

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我一般原代的细胞都用纯血清+SIGMA DMSO冻，复苏的效率一般都很高。应该是因人而异吧。

supercell

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我一般原代的细胞都用纯血清+SIGMA DMSO冻，复苏的效率一般都很高。应该是因人而异吧。

avbn

纯血清加10%DMSO 应该是没问题的，注意冻存环境，不要在-80中放太久