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关于冻存   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-4-28 17:59 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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不知道各位冻存ADSC的时候冻存液的配方是什么,是只用血清么
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沙发
发表于 2013-4-29 21:54 |只看该作者
用培养基和血清都可以,10%DMSO
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藤椅
发表于 2013-4-30 19:48 |只看该作者
回复 倔强的投手 的帖子$ R- T% ~( K$ w- T7 ~
8 b5 e1 N! W& Y! Z- W
这样啊,以前用培养基血清DMSO 6:3:1,然后细胞都孵不出来,都死了,这样怎么回事呢
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板凳
发表于 2013-5-1 09:35 |只看该作者
我是用纯血清,加10%的DMSO,但是现在也遇到一个问题,就是细胞复苏不起来,基本不贴壁,我用程序冻存盒冻的,之前复苏过,很容易复苏起来,现在却怎么也复苏不起来,而且好几种细胞都是这样
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报纸
发表于 2013-5-2 09:34 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子  K/ ^! K3 C  U7 Y" Q& F1 C
0 F2 Y- n$ G7 U; g4 L
冻存方法无大的问题,我想问题在你的冻存环境,如MSCs长期冻存在-80冰箱活性会有影响,如不是,那可能考虑你的液氮罐密封性的问题。
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地板
发表于 2013-5-2 09:36 |只看该作者
回复 江如练 的帖子: Y1 C6 H- z; B8 h2 r- z
" y8 E1 a' J4 w/ z5 P' b: {
培养基血清DMSO 6:3:1或者血清:DMSO9:1都是可行的冻存方式,如果细胞复苏活性差,有可能是冻存条件的问题,也有可能是细胞质量的问题。细胞质量包括你冻存前细胞的密度和是否过度消化。此外,不会有其他原因。
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7楼
发表于 2013-5-2 09:56 |只看该作者
回复 supercell 的帖子
4 b( G/ g# L' f0 m3 b) u0 S
* F+ \! d% f2 o- _9 q纯血清:DMSO冻细胞是真不行,我试了,纯血清冻的细胞不能复苏起来,都是用冻存盒冻的,但是5:4:1(血清:DMEMMSO)的可以
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8楼
发表于 2013-5-2 10:20 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子! @: a# `7 A  v3 k5 O# W4 k

+ _  Q4 o' S2 f9 g我一般原代的细胞都用纯血清+SIGMA DMSO冻,复苏的效率一般都很高。应该是因人而异吧。
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9楼
发表于 2013-5-2 10:20 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
5 G; G5 G6 m4 I0 ?: L. O1 H3 F8 }, t% z
  c& z" d3 P' E% Z4 C我一般原代的细胞都用纯血清+SIGMA DMSO冻,复苏的效率一般都很高。应该是因人而异吧。

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10楼
发表于 2013-5-2 16:53 |只看该作者
纯血清加10%DMSO 应该是没问题的,注意冻存环境,不要在-80中放太久
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