CIK早期培养



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chenguangyu

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发表于 2013-5-6 12:49 |显示全部帖子

抽50ml外周血大家都是用多大瓶子培养cik（早期）？75？25？ 25的会不会更好，更节省因子？

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yinfuhua

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发表于 2013-5-6 13:49 |显示全部帖子

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用75的就好。因为加入因子后细胞会增殖，数量很多的。或根据细胞数量：2-3*10的6次方。供参考。

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zhanglei1414

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发表于 2013-5-7 21:56 |显示全部帖子

我用175的，一样能养，加50ml培养基

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zhanglei1414

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发表于 2013-5-7 21:56 |显示全部帖子

我用175的，一样能养，加50ml培养基

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weijunning

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发表于 2013-5-8 15:16 |显示全部帖子

如果提取的细胞数在1x107以下，属于比较少的范畴，建议用75或25的瓶子养；如果提取的细胞数肉眼观察比较多，在3X107左右，用175的瓶子养也没问题，但是75的瓶子会更好一些。选择瓶子的原则就是尽量让细胞密度变大，这样有助于CIK细胞的前期生长；等过4~6天后，观察细胞密度，并计数，按2X105的密度铺袋培养，效果会更好。

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lyj-0017

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发表于 2013-5-24 15:36 |显示全部帖子

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请问你们一般用多大培养袋？转袋时一般首次加多少体积培养基呢？

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weijunning

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发表于 2013-5-27 14:11 |显示全部帖子

我们用TAKARA的1.8L的培养袋，每份样本需要用两个培养袋进行培养。刚开始转袋时，因为样本差异性，最少的为180ml/袋，最多的大约在600ml/袋。一般转袋时按5~9x108/ml的密度转袋，如果转袋时算出的体积少于180ml，不建议马上转袋，可以再培养两天再进行转袋；对于实在长不起来的样本，可以在原瓶中继续培养。一般的转袋体积控制在300ml/袋。