神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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% t2 j) S/ x* |* q, n1 h) S  H8 s! c我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc
. U7 `) U3 g" F2 @9 k0 U完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家- E( x" {3 A9 D/ Y9 k7 ~

. ?/ m  [+ w; {. q) q4 C采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿* s" f7 G" A9 e3 T; O) b/ d
1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™
% z) _  K$ A( ]CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
" [" K$ h: M2 G5 R. Q( F( H注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。/ T( m' a3 ]' j- j7 h5 |6 W4 H, @% d7 g
2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm
. l1 |. X, m: }% P! w" D. Y& @5 S/ o; ^培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。# @1 ?$ B( c$ L* D" _
3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。+ g$ M0 M4 q; x9 o
4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
1 x2 a" _6 E, C' i% g5 P( ~& T注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。5 s; U4 A+ `1 [

. a, G3 ^& a: I" d! r! M& U# n4 `采用纤连蛋白包被培养器皿1 o- F* Q+ O9 s) M( U0 n+ |
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。
( }7 }" C. r0 b, n2 J% o0 U2. 将工作液置于-20°C下保存待用。
& u" p2 z' K# T( h) H, \3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
/ S" r" M3 T/ J/ E( l4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-2 \  }1 j# H, a7 T! U3 A
mm培养皿: 1.5 mL) 。
- U- r: z' H, f" O( j+ W5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。
2 D$ l; b- y1 @9 q6 ]/ |7 y6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
7 Q" B9 U/ N# S注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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' k6 x* T% w3 }# n. S# v; U9 Z+ ?4 c% B$ N. ]8 M( D: h4 l
非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子# ~3 R* v8 J0 U) f

& C" {; m' W* H  I7 Z- }我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。+ v+ v# `. ]! g
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http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html