干细胞培养中出现的怪象

花饶然

请教：  我在养间充干的时候（脐带），发现在培养到高代次（P20）左右，发现培养瓶中有少部分地方，细胞汇聚成团了，大的肉眼都能看清楚，一个白色颗粒，更大的就会脱落下来了，请问高手们这是什么情况？

FreeCell

EB？

wf78365421

: f, u; R. ~! m+ M& r2 ^4 o( S
# h8 N8 G6 A! M+ g应该是骨或者软骨分化，可以染色鉴定一下

小冬子

遇到过这种情况，应该是细胞过于密集，重叠导致的

老十

这个是干细胞过于密集，而且你是不是没有及时传代换液

花饶然

不是过密和没有及时传代的缘故，在没有完全融合时，我发现有的地方细胞就开始汇聚成一团了，低代的时候没有的现象。这个跟它的致瘤性有木有关系啊，体外培养时间太久了，都20多代了

rogers0929

同意3楼，一般来说是软骨分化或者骨细胞分化的征兆。建议alchian blue或者alizarin red染色一下便知。

lovesxj941

有过这种现象，往往是细胞局部密度过高，高密度的骨髓间充质会自发向骨、软骨分化；脐带间充质不一定诶。如果保持细胞密度均匀，90%-100%密度的话不会出现这种现象。

dongxin

回复 花饶然 的帖子% {! |  f$ R' Y% B2 a9 ~

% c! h: x% R" {也出现过类似现象，应该是细胞过密导致的，若再不处理细胞就会死亡，脱落，发生这种原因个人觉得是在做传代处理时没有将细胞打散混匀，而导致局部小面积细胞过密，所以可以尝试在传代操作过程中尽量将细胞打散混匀！供参考，祝好运！

花饶然

回复 dongxin 的帖子
: [1 e. J9 j2 \& o4 @$ Z) J6 h% y4 T4 _# C
谢谢各位高人指点!  可是本人还是觉得吹打得比较均匀了的，后来我特别注意下传代后动态如何，关键是不密的时候，有些地方也慢慢汇聚成球状啊，圆圆的一般是。肉眼看就是圆形的颗粒物。我所述的这种现象在养脐带和脂肪间充干出现的。还是高代次的，请问高手们这两种容易向骨和软骨方向分化么