CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

sunny.yc

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& [# C8 D! c! g6 k/ b
一个解释是，细胞受细胞因子刺激过度，有些患者的细胞不太能耐受细胞因子刺激: e/ M# `# l. ]: H) L' u
还一个解释是，自体血浆没有灭活
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还有，培养基预热的话，可以扔培养箱也可以水浴，不过我不太建议用37℃，25℃就可以，我个人的经验是觉得37℃对培养基里的成分损失比较大
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以上都是个人意见，望有高手点评

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子  K6 n# l7 U$ i& m! L) v" q9 F

1 J0 }% O+ ^* N. l2 W: Q如果实验室有HH-1的水浴锅，那1L的培养基瓶子正好可以放进去，培养箱不太好，因为培养基瓶子也不一定干净，你不能保证你的冰箱就完全无菌吧，如果带进培养箱反而不好，弄不好污染了培养箱里的细胞，而且水浴锅水导热也比空气快，所以还是水浴锅吧。' l8 j. M4 J/ |: @- L2 e  F6 {
培养基变紫这个问题，在培养箱或水浴锅都是一样的，因为你都是瓶盖拧上的，所以，没啥区别，再说培养基也是个缓冲体系，酸碱度变化不会很大的。
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( _& M  _8 B# u' |6 C2 A! R还有，我觉得，有可能是IL-2，最近翻了一下Rosenberg主编的《癌症生物治疗——原理与实践》，里面有几句话对IL-2的描述是这样的——鼠剔除IL-2后，可使T细胞过度且无法控制地增值，因而提示IL-2不是T细胞在体内生长的必须因子，而是T细胞凋亡所必需。

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子5 G# l: p! ]; G8 p

: W& A! _( q! @你试一下100ng/ml和1000U/ml吧，2000U/ml的IL-2实在是有点高了，大多都是300U到1000U，2000U我也是第一次听说
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不过，如果你现在才更改浓度，对于这份细胞来说，我觉得意义已经不大了，不过在对以后的实验肯定是有帮助的，2000U/ml，有点太高了

sunny.yc

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) k5 ~" F2 w3 Y9 g7 b$ G- M; p4 Z9 Q9 h, R6 S3 ?' M7 \& j1 L6 T
还有就是，CD3单抗也只是前期才用到，所以，对于之后的扩增影响不是太大，而且单抗一般都是作为前期一次刺激就可以了$ L* N' O9 {/ ]* q
* ?8 y$ F3 u6 [* ^9 B
你不会一直在添加单抗吧，呵呵

sunny.yc

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% t0 V/ w' z' D( R
" h6 S: b* @1 aIL-2基本上都是用临床级的，试剂级的太贵了
. T5 L9 j5 z1 }IL-2你先试一下1000吧，基本上都是这个使用量的& h# G& `3 y9 d2 |  X, y: o
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CD3单抗也不算高，如果你只是前期加，100ng/ml 应该问题不大，我做的培养体系也是这个浓度，基本上没有什么问题

sunny.yc

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6 a; A6 S. ~4 D9 z$ K* C% x9 M) T7 Z
你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

sunny.yc

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: z3 N# ]% m0 ]0 _1 C2 T$ ]  N3 \/ a& O
你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

sunny.yc

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+ s* X& e  \, i, t0 j2 H( U& e. f7 p: k' K' t  t- O
建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的
* U& ^" n" L2 j' j5 a# v
5 `3 z- ^- l2 o% V; m3 G2 r, I如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子5 U: X8 N" W% R7 h2 D' _6 Y

5 y7 s$ U- P1 q; L+ d8 e可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！