流式细胞仪 CD34

刘小白and刘小黑

用流式细胞仪做CD34检测，每份脐带血的CD34的图谱有特异性吗？CD34的百分含量有最大值吗？上次做了一份百分含量为1.59%，这个正常吗？

miltenyi

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有没有用BSA封闭呢，还有补偿调节都没问题吧？

miltenyi

哦？美天旎的流式抗体染色基本都是2-8度，貌似有些品牌的流抗可以室温染色的，不过要缩短染色时间，你根据抗体说明书做的话应该没问题，另外，可以咨询一下你用的抗体的技术支持，他们更了解自己的抗体，也许会有更好的建议

刘小白and刘小黑

回复 三月桂花香 的帖子7 ~( I" h+ E6 B5 s; ?. h

4 v+ n2 _* a/ R! }9 p就是觉得有点高啊  呵呵

刘小白and刘小黑

回复 miltenyi 的帖子
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关于CD34的东西 我在网上也查过资料 知道温度影响挺大的 我用的25-27摄氏度 不知道有没有问题

刘小白and刘小黑

回复 Life_Tech 的帖子3 B9 p$ a7 @( @! o* ]

. }6 H% y* c- A+ \1 h$ x有做阴性对照 用的CD45标记，然后阳性是CD34 阴性是IgG  应该是抗原抗体结合被标记 在通过荧光检测的嘛 这个样本我做过两遍都是一样的值  

miltenyi

脐带血里的CD34细胞比例大概是0.1-0.5%，有可能是非特异性染色，抗体浓度，染色时间，温度还有封闭步骤都可以检查一下，祝后续实验顺利哦！

三月桂花香

做同型对照 ，看看，但是如果是脐血的话是不是高了点~~

Life_Tech

回复 刘小白and刘小黑 的帖子& K& g8 u. |. M6 {$ j' [& H, C

: M! g7 C. _, _0 ], u0 z有可能有一些非特异性染色，对照做好了吗？通常我们都是用不染色的作为阴性对照，但是如果抗体的特异性不是特别强，最好选择同型对照染色作为阴性对照。

cantonchn

目前没有确切的范围，但是有经验值~~~这个值可能含有其他杂质吧~~~