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成脂分化油红O染色没染出来,大家来看看我的照片   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-8-12 16:35 |只看该作者 |正序浏览 |打印
步骤写下来:" V+ |: j& ?/ H" i# u7 }
1.MSC成脂诱导12天后开始染色。
0 b. n) t/ B* C  @2.4%多聚甲醛固定10min,PBS清洗。油红O工作液:双蒸水=3:2体积稀释,60度水浴10mn,滤纸过滤,常温下再冷却10min。
  I0 g1 L  [( A( r6 q7 O4 U) ^- n3.12孔板中加入1ml配置好的油红O染色20min,结束后PBS漂洗,显微镜下观察。
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发表于 2013-11-3 22:05 |只看该作者
应该是没有诱导成功呢,一般诱导7天的时候就能很明显的看见圆形的油滴,12天油滴就会很大了!
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发表于 2013-10-25 15:49 |只看该作者
我觉得像染色没洗干净啊,貌似不是油滴~~
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优秀版主 金话筒 优秀会员

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发表于 2013-9-20 09:59 |只看该作者
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染色没问题,有着染脂滴,但是你诱导的时间短了,多脂滴尚未汇合成单脂滴,延长下诱导时间吧。20天左右……
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发表于 2013-9-15 18:07 |只看该作者
脂肪干细胞成脂肪诱导还是很容易的,不需要太多时间,我做的五天就能看到脂滴,2周染色状态以及特别好了
0 a& c8 Y* {; ~9 F+ ?  U- t你的问题是:诱导液是不是有问题?染色的时候注意固定和漂洗,都要小心把脂滴弄没了,还有就是要高倍下看细胞内染色情况
% W$ o& t1 M, Y# G! |8 _8 l8 R. R
其实脂肪干细胞长时间不换液,就那么一直放着自己都会往脂肪细胞方向分化的了
; Q) s/ ]% ~. s5 H1 |加油,再来一次
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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-9-12 14:54 |只看该作者
你的这个染色是失败的。
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优秀会员 帅哥研究员 积极份子

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发表于 2013-8-14 14:28 |只看该作者
什么时候加的分化培养基?. j# v! u  l: m8 `' X# v  l
可能分化时间不够,试一下14~21天。  v  n3 {' v& P/ Z4 ?
10X20以上镜下观察。
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发表于 2013-8-14 13:43 |只看该作者
2句话。第一句,分化效率非常低;第二句,把高倍镜的那张重新调整焦距观察,貌似有少量脂滴。
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发表于 2013-8-14 13:36 |只看该作者
这个是诱导时间不够的原因,诱导一个月再看看
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地板
发表于 2013-8-13 12:49 |只看该作者
回复 limeiying 的帖子3 S9 O  i5 K  |0 F' B
6 F! ]9 I0 e4 U1 U& J+ ]
你好,下面是高倍镜拍的。
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