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arneyda

新手上路

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楼主

发表于 2013-8-14 22:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

重组质粒有一个启动子，多段核糖体跳跃序列，转染到干细胞后，检测标记基因GFP没有表达，原因可能是什么呢

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沙发

发表于 2013-8-15 00:14 |只看该作者

信息太少了。是多蛋白表达载体？6 C% w8 H$ g$ _& D
不如把MAP贴出来看看。

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chips100

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藤椅

发表于 2013-8-16 09:19 |只看该作者

推测是2a连的很多表达框，最后是gfp，结果没表达

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qkzhang

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板凳

发表于 2013-8-16 11:24 |只看该作者

１．应该检测一下始动子到终止子（包括ＧＦＰ序列）是否配对成ｃｏｄｅｎ: ]/ S/ c0 \/ t& k2 m/ R/ e( d
２.　启动子是否有效
３.　转染效率问题; @% e2 x9 F# |. Y1 B" Q8 a

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chips100

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报纸

发表于 2013-8-20 09:57 |只看该作者

如果表达框很长，后面的gfp是可能看不到的，用gfp抗体才能检测到

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